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1. 體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5% 異氟醚深度麻醉小鼠,，然后2.5% 異氟醚維持麻醉,。

2. 在頸部中線切開一個(gè)切口。

3. 分離右側(cè)的頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng),。

4. 右側(cè)的頸總動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎,。

5. 分離右側(cè)的頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈，右側(cè)的頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎,；右側(cè)的頸外動(dòng)脈頭端結(jié)扎,，近心端掛線備用。

6. 隨后,，用無菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動(dòng)脈上做一個(gè)小洞,，然后插入線栓，近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動(dòng)脈的線栓,，以防止血從小洞中流出,；松開右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線，輕輕送入線栓到大腦中動(dòng)脈,，當(dāng)感覺到阻力時(shí)停止,，系牢線栓。

7. 縫合皮膚,。

線栓法阻斷大腦中動(dòng)脈的方案

8. 60min后,，線栓輕輕從大腦中動(dòng)脈移出，系牢頸外動(dòng)脈結(jié)扎線,；然后松開右側(cè)頸總動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線,，小鼠進(jìn)行再灌注。

9. 48h后神經(jīng)功能評(píng)分,，Garcia評(píng)分,。

1）.自發(fā)性活動(dòng)；

2）.四肢運(yùn)動(dòng)的對(duì)稱性,；

3）.前爪伸展,；

4）.爬行；

5）.身體本體感覺,；

6）.觸須反應(yīng),。

MCAO術(shù)前的小鼠評(píng)分在17.9±0.25分左右，缺血再灌注損傷48h后,，評(píng)分在13.5±2.3分,。