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傳代培養(yǎng)操作步驟：

一,、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí),，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,。加入PBS清洗1~2次,，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底,。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓,、細(xì)胞間隙變大時(shí),，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,，使用吸頭輕輕吹打,，混合均勻，以防消化過度,。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清,，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散,。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)足培養(yǎng)液,，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

HTB-80人胰腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）,。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí),，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染,。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長,。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣,，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液,。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用,?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成,。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷,。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,，再加入培養(yǎng)液重懸,，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率,。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ALVA細(xì)胞,，人前列腺癌細(xì)胞 大鼠氣管上皮細(xì)胞,RTE細(xì)胞 大鼠腦膜細(xì)胞RMC 人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

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CM-R017大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

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婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-3 大鼠內(nèi)皮素受體A(E-A)ELISA試劑盒 UBC(Human urinary bladder cancer antigen)  人膀胱癌抗原 96T

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HTB-80人胰腺癌細(xì)胞KLHL14： Kelch樣蛋白14抗體 CA4 Others Mouse 小鼠 Car4 / CA4 / CAIV 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人骨骼肌成肌細(xì)胞裂解物HSkMML 綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA 試劑盒 CD339/Jagged1 CD339/Jagged1抗原 0.5mg

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CAL-27(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml 綿羊白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 C-fos 即刻早期基因(一種原癌基因)抗原 0.5mg

KLHL32： Kelch樣蛋白32抗體 人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝