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| 參考價 | ￥1500-￥3800 | /件 |
參考價：￥1500 ~ ￥3800
更新時間：2024-12-05 07:16:04瀏覽次數：342評價
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| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 1×106cells |
|---|---|---|---|
| 貨號 | E-XB6390 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
| 種屬來源 | 人 | 組織來源 | 肝 |
| 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
C3A人永生化肝細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | C3A人永生化肝細胞 | 組織來源 | 肝 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
細胞規(guī)格 | 1x106cells/T25或1mL凍存管 | 凍存條件 | 無血清凍存液,，液氮儲存 |
細胞詳細介紹：
細胞別稱 C3A；人永生化肝細胞 支原體檢測 無 培養(yǎng)基 MEM+10% FBS+1%雙抗 培養(yǎng)條件 氣相：95%空氣+5%二氧化碳,；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液,，液氮儲 發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究,，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
傳代培養(yǎng)操作步驟：
一,、貼壁培養(yǎng)
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度,，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代,。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液,。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉,。
（3）根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化,，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,，當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打,，混合均勻,，以防消化過度。
（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min,。
（6）棄上清,，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻,，使細胞均勻分散,。
（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,，補足培養(yǎng)液,，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),。
（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,，甚至進行細胞凍存。
二,、懸浮細胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）,。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代,。
（1）嚴格進行無菌操作,，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,，以免細胞發(fā)生污染,。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類,、組織類型的細胞,，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液,。
（3）胎牛血清對于維持細胞生存,，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清,。一旦確定，就應保持用至實驗完成,。
（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少,，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡,，影響細胞數量和實驗進度,。
（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,，或離心力過大對細胞產生損傷,。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸,，這樣比直接吹打對細胞損傷小,，可以提高細胞活率。
（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,，以免損傷細胞,，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。
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