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產(chǎn)品應(yīng)用  Flow-Cyt=1:50-200 IF=1:50-200

not yet tested inother applications.

optimaldilutions/concentrations should be determined by the end user.

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別 名  9830134P12Rik; APG4 autophagy 4 homolog D; APG4 D; APG4, S. cerevisiae, homolog of, D; APG4D; ATG4 autophagy related 4 homolog D (S. cerevisiae); Atg4d; ATG4D_HUMAN; Atg4dl; AUT like 4 cysteine endopeptidase; AUT-like 4 cysteine endopeptidase; AUTL4; Auto?紘?

一抗可用于檢測(cè)糖尿病,、癌癥,、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標(biāo)志物。二抗則主要用于檢測(cè)和純化抗原蛋白,。

二抗在標(biāo)記和檢測(cè)方面比較靈敏和靈活,。所以，它們?cè)诹魇郊?xì)胞術(shù),、蛋白質(zhì)印跡和細(xì)胞成像等一系列應(yīng)用中用于一抗的比色,、化學(xué)發(fā)光和熒光檢測(cè)。二抗類型的選擇基于一抗的類別：免疫球蛋白 IgG 或 IgM、標(biāo)簽類型和來源宿主,。

由于大多數(shù)一抗是使用少數(shù)宿主物種開發(fā)的,，并且大多數(shù)一抗屬于 IgG 類，因此制造商通常提供可用于許多不同檢測(cè)程序和系統(tǒng)的即用型二抗,。常用的二抗有抗兔 IgG,、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG,。所選擇的二抗應(yīng)始終能夠識(shí)別產(chǎn)生一抗的宿主物種，例如,，為了檢測(cè)從小鼠產(chǎn)生的一抗,，使用抗小鼠二抗。在 ELISA 和蛋白質(zhì)印跡中,，標(biāo)記通常是化學(xué)發(fā)光,、比色或基于熒光的，但在流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光中,，僅使用熒光標(biāo)記,。

一、 免疫動(dòng)物選擇

根據(jù)需要產(chǎn)生目標(biāo)抗原的免疫反應(yīng),，選擇合適的免疫動(dòng)物,。例如，小鼠是免疫動(dòng)物之一,，因其易于操作且在免疫應(yīng)答方面較為強(qiáng)大,。

二、抗原免疫

將目標(biāo)抗原注射到免疫動(dòng)物體內(nèi),，通常需要多次免疫以激發(fā)免疫反應(yīng),。可以選擇不同的免疫路線,，如皮下,、腹腔、靜脈等,。

三 ,、細(xì)胞融合

從免疫動(dòng)物獲得脾細(xì)胞或淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞或其他癌細(xì)胞（如SP2/0,、NS0等）融合,，形成雜交瘤細(xì)胞。融合細(xì)胞通常使用（PEG）或電穿孔等方法促進(jìn)細(xì)胞融合,。

四,、 雜交瘤細(xì)胞篩選

對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行篩選，一般使用HAT選擇性培養(yǎng)基，通過對(duì)非雜交瘤細(xì)胞和單克隆雜交瘤細(xì)胞的抗代選擇,，篩選出產(chǎn)生目標(biāo)抗體的單克隆雜交瘤細(xì)胞,。

五、 單克隆抗體生產(chǎn)

從篩選出的單克隆雜交瘤細(xì)胞中獲取單一細(xì)胞系,，并進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)和產(chǎn)生抗體,。一般可采用體外或體內(nèi)方式