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| 參考價 | ￥300-￥5000 | /盒 |
參考價：￥300 ~ ￥5000
更新時間：2024-11-23 09:56:24瀏覽次數(shù)：1191評價
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 50管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | EY-01S1364 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
肉桂酸4羥化酶（C4H）生化檢測試劑盒 | 100管/96樣 50管/48樣 | EY-01S1364 |
測定意義：
C4H又稱反式肉桂酸-4-單氧化酶,，多存在于高等植物,、酵母、菌類中,，該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆酸鹽,，是苯丙烷途徑中繼L-苯解氨酶之后的第二個關(guān)鍵酶。
測定原理：
C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH,，在340nm下測定NADPH生成速率，即可反映C4H活性,。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀,、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板,、研缽、冰和蒸餾水,。
試劑一：液體×1瓶,，室溫保存。
試劑二：液體×1瓶,，4℃保存,。
試劑三：粉劑×2瓶,，－20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,，現(xiàn)配現(xiàn)用,。
試劑四：液體×1支，4℃保存,。
1,、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿,。16000g,，4℃離心20min，取上清置冰上待測,。
2,、細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w,，超聲3秒，間隔7秒,，總時間3min）,；16000g， 4℃離心20min,，取上清液置冰上待測,。
3、血清等液體：直接測定,。
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（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計算
活性單位定義：25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計算
活性單位定義：25℃中每104個細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103L/mol/cm,；d：比色皿光徑,，1 cm；V反總：反應(yīng)體系總體積,，1000μL=0.001 L,；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積,，100μL=0.1 mL,；T：反應(yīng)時間，1min,。
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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