日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

測定意義：

幾丁質(zhì)主要存在于蝦,、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),，以及真菌類的細(xì)胞壁中,。而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用,，成為抗真菌病害的研究熱點,。

測定原理：

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基糖,，進(jìn)一步與DNS試劑反應(yīng)產(chǎn)生棕紅色化合物,，在540nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性,。自備實驗用品及儀器

天平,、水浴鍋、離心機,、可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（土壤樣品專用）和蒸餾水,。

試劑一：液體×1瓶,，室溫保存。

試劑二：液體×1瓶,，4℃保存,。              

試劑三：粉劑×2瓶，－20℃保存,。臨用前加入22mL試劑二,，現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑四：液體×1支,，4℃保存,。

1、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿,。16000g，4℃離心20min,，取上清置冰上待測,。

2、細(xì)菌,、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒,，間隔7秒,，總時間3min）,；16000g， 4℃離心20min,，取上清液置冰上待測,。

3、血清等液體：直接測定,。

（1）按照蛋白濃度計算

活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

（2）按照樣本質(zhì)量計算

活性單位定義：25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

（3）按細(xì)胞數(shù)量計算

活性單位定義：25℃中每104個細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量

（4）按液體體積計算

活性單位定義：25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103L/mol/cm,；d：比色皿光徑,，1 cm；V反總：反應(yīng)體系總體積,，1000μL=0.001 L,；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積,，100μL=0.1 mL,；T：反應(yīng)時間，1min,。