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【方法】利用亮發(fā)光桿菌富集培養(yǎng)基分離喜樹種子內(nèi)生放線菌,，并根據(jù)菌落形態(tài)及 16S rRNA 基因序列同源性分析進(jìn)行菌種鑒定；以及利用與病原微生物共培養(yǎng)方法檢測分離菌株的抗菌活性,。

【結(jié)果】從上海交通大學(xué)校園的喜樹種子中共分離到 33株內(nèi)生疑似放線菌,，經(jīng)基于 16S rRNA基因序列分析的分子鑒定，確定其中 21 株屬于鏈霉菌,，1 株屬于擬諾卡氏菌,，另有 3 株由于序列相似性低于 95%而無法分類；8 株因未能克隆 16S rRNA 基因序列而未確定分類,。這 11 株疑似內(nèi)生放線菌是否是新放線菌(種)類群,，有待后續(xù)深入研究。初步的抗細(xì)菌,、真菌活性檢測發(fā)現(xiàn),，分離到的內(nèi)生放線菌中 42.42%以上對立枯絲核菌(Rhizoctonia solani Kühn)有很強(qiáng)的抑制菌核形成的作用，54.54%內(nèi)生菌有較強(qiáng)抑制芽孢桿菌生長的作用,。并且挑選其中具有代表性的菌株 Streptomyces sp. CXSZ1 進(jìn)行代謝產(chǎn)物的分析,，初步發(fā)現(xiàn)其代謝產(chǎn)物中含有抗細(xì)菌活性成分。

【結(jié)論】喜樹種子內(nèi)生放線菌的分離,、鑒定及生物活性物質(zhì)分離鑒定的研究工作,，一方面可以為揭示喜樹等高等植物種子內(nèi)生菌的起源、演化等提供有價值的信息,，同時也為新結(jié)構(gòu),、新活性化合物發(fā)掘提供實驗材料。

植物內(nèi)生菌長期生活于某種植物內(nèi)部,，因其*的生存環(huán)境,，可能進(jìn)化出與宿主植物類似的代謝途徑與產(chǎn)物,。近年來,，植物內(nèi)生菌作為一種新的微生物資源，而成為天然產(chǎn)物發(fā)掘的熱點,，并成功篩選到了紫杉醇,、鬼臼毒素、長春堿等化合物產(chǎn)生菌,。獲得特定生物活性物質(zhì)產(chǎn)生菌,，不僅為環(huán)保、可持續(xù)天然產(chǎn)物,，及實現(xiàn)規(guī)?；峁┝擞欣麠l件；同時,，也為復(fù)雜天然產(chǎn)物生物合成途徑理論研究提供了更好的實驗材料,。

喜樹為我國*珙桐科高大喬木,，其次生代謝產(chǎn)物中的喜樹堿(Camptothecin，CPT)通過作用于拓?fù)洚悩?gòu)酶 I (Topo I),，而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,。喜樹堿及其衍生物已被廣泛應(yīng)用于肝癌、胃癌,、膀胱癌及白血病等的臨床治療,。迄今對于喜樹內(nèi)生菌的研究主要集中在內(nèi)生亮發(fā)光桿菌，并且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了能夠產(chǎn)喜樹堿的內(nèi)生真菌,；對喜樹的根,、莖、葉等器官中的內(nèi)生放線菌已有研究,，但對喜樹種子內(nèi)生放線菌的研究尚未見報道,。
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亮發(fā)光桿菌