檢查待測(cè)物對(duì)細(xì)胞的毒性試驗(yàn)有體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)之分,。體外試驗(yàn)是檢查待測(cè)物對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的影響,，方法是將一定量待測(cè)物作用于體外培養(yǎng)細(xì)胞，再通過(guò)觀察或測(cè)定細(xì)胞增殖,、存活率,、形態(tài)改變、DNA合成及遺傳性狀等變化對(duì)細(xì)胞的毒性作用,。
(一)化學(xué)物質(zhì)的一般毒性檢測(cè)
要了解化學(xué)物質(zhì)對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞一般生物學(xué)性狀的毒性作用,，首先將不同稀釋度的待測(cè)化學(xué)物質(zhì)加至一定數(shù)量的培養(yǎng)細(xì)胞中，培養(yǎng)一定時(shí)間后,，觀察細(xì)胞形態(tài),、存活率、增殖情況及DNA合成情況,。該方法簡(jiǎn)單易行,。例如測(cè)定DNA抑制劑或RNA抑制劑的作用時(shí),?？刹捎迷摲椒ā?/p>
(二)培養(yǎng)細(xì)胞染色體畸變分析
體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到化學(xué)致突變物的作用,，其染色體可發(fā)生結(jié)構(gòu)或數(shù)目的改變,，根據(jù)染色體畸變頻率的高低及畸變類(lèi)型來(lái)判斷待測(cè)物的致突變性。方法是在體外培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞(如CHL細(xì)胞)中加入不同劑量待測(cè)物一定時(shí)間后,，加入秋水仙素以抑制細(xì)胞分裂時(shí)紡錘體形成,，增加中期分裂象細(xì)胞數(shù)，顯微鏡下觀察分析染色體畸變細(xì)胞數(shù)及畸變類(lèi)型,。
(三)哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)
哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)是利用嘌呤類(lèi)似物選擇突變細(xì)胞的試驗(yàn),。其原理是次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶(HGPRT)是HGPRT位點(diǎn)的表達(dá)產(chǎn)物。該酶是細(xì)胞內(nèi)嘌呤核苷酸生物合成的補(bǔ)救途徑,，如果該酶失活則不引起細(xì)胞致死,；但當(dāng)培養(yǎng)基中含有嘌呤類(lèi)似物(如6一硫基嘌呤、6-硫代鳥(niǎo)嘌呤,、8-氮鳥(niǎo)嘌呤)時(shí),，該酶能以這些類(lèi)似物為底物，生成有毒性的核苷一5一單磷酸，此物質(zhì)摻人到DNA中則能引起細(xì)胞死亡,。但如果細(xì)胞HGPRT位點(diǎn)發(fā)生突變時(shí),，細(xì)胞對(duì)這些嘌呤類(lèi)似物具有抗性，仍能在含有嘌呤類(lèi)似物的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),，故利用此試驗(yàn)?zāi)苓x擇突變細(xì)胞,。主要方法是將一定數(shù)量哺乳細(xì)胞(如V79)接種于培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)24h后,，加入一定濃度致突變待測(cè)物作用一定時(shí)間,，再接種含有嘌呤類(lèi)似物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天后固定染色，計(jì)數(shù)每皿中細(xì)胞形成集落,，與對(duì)照相比,，計(jì)算出待測(cè)物各濃度組的相對(duì)集落形成率，算出突變率,。
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