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ELISA各個操作步驟的注意要點(diǎn)

閱讀:925      發(fā)布時間:2015-10-7
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    按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑,。ELISA中用的蒸餾 水或去離子水,包括用于洗滌的,,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正,。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存,。

    ELISA試劑盒的配制:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,,瞬時離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),,將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。 一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。ELISA試劑盒可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒,、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。為了優(yōu)化靈敏度,,建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。

    ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn),。    本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點(diǎn),ELISA檢測試劑盒珠式,、管式及磁性球ELSIA,,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用。

    可用作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛,,體液(如血清 ),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份,。ELISA試劑盒有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清 ,、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。這些標(biāo)本收集的時間,、方法和保存都有一定的要求。

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