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方法

1.準備感興趣的目標細胞,。
2.表面染色后的細胞表面抗原。表面標記的選擇取決于實驗問題,。在不同類型的細胞的表型標記,，建3.議請查看相應的bestphenotyping標記圖：小鼠或人。
4.zui后一次洗滌后,，加入固定液100μ雖然渦流管和潛伏在黑暗中在室溫下20分鐘修復細胞,。
5.添加1毫升每管通透性緩沖液，離心5分鐘,，吸出上清液,。
6.重復步驟4。
7.懸浮細胞的通透性的緩沖區(qū)100μL和潛伏在黑暗中在室溫下5分鐘,。
8.用20μl通透性緩沖抗細胞因子的單克隆抗體熒光標記的*濃度和添加適當?shù)墓?。混勻,。此應用?.序的抗體好的范圍0.5-0.06μ克/ 106細胞,。eBioscience熒光標記的抗細胞因子抗體也可在20μL /測試規(guī)格。如果使用這些試劑,，加入20μL預滴定抗體相應的管。
10.潛伏在黑暗中在室溫下20分鐘,。
11.增加通透性緩沖液1 mL,，離心5分鐘，吸出上清液,。
12.懸浮細胞顆粒流染色緩沖液0.5毫升,。
13.使用流式細胞儀分析。