1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,，然后在*,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻,；然后從*孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,，混勻；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為15 ng/ml ，10 ng/ml,，5ng/ml,，2.5ng/ml，1.25ng/ml）,。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
Androgen receptor雄激素受體抗體
AVEN細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡,、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)
Axin1軸蛋白1抗體
ATG9B自噬相關(guān)蛋白9B抗體
Apg12自噬相關(guān)蛋白12抗體
ATG13自噬相關(guān)蛋白13抗體
ATG3自噬相關(guān)蛋白3抗體
ADAMTS4整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體
phospho-ATF2 (Ser490/498)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757)磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體
ACTR絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體
ADAM18去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
ATF6活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體
AP2 beta銜接蛋白β抗體
Gamma-Adaptin銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體
AQP9水通道蛋白-9抗體
Annexin A3膜粘連蛋白A3抗體
Annexin IV膜粘連蛋白 A4抗體
APG8A自噬相關(guān)蛋白8A抗體
phospho-Akt (Thr450)磷酸化蛋白激酶B抗體
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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