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牛丙酮檢測elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)使用步驟：
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡,，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,。給酶標(biāo)板覆膜,，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
3.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜,，37℃溫育1小時(shí),。
4.棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，方法同步驟3,。
5.棄去液體，甩干,，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí),。
6.棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板 3次,，每次浸泡1-2分鐘,，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。6.每孔加底物溶液100μl,，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘,。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng),，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值),。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器,，設(shè)置好檢測程序,。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。