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亮發(fā)光桿菌的活化原理及步驟

閱讀:1161      發(fā)布時間:2018-5-10
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亮發(fā)光桿菌的活化步驟:配置菌種適宜生長的培養(yǎng)基,、將菌種從保藏狀態(tài)恢復到室溫狀態(tài),、將通過操作將保藏的菌種接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)、挑選培養(yǎng)基茁壯的菌落,。

菌種活化就是將菌種保藏中心處于保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),,逐級擴大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的,、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物,。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復壯過程,因為保存時的條件往往和培養(yǎng)時的條件不相同,,所以要活化,讓菌種逐漸適應培養(yǎng)環(huán)境要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法,。目前國內(nèi)常用的菌種保存方法包括:定期移植法、液體石蠟法,、沙土管法,、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法,、液氮超低溫凍結(jié)法,。對于不同的保存方式活化的方式也不同:

1,、定期移植法的菌種復蘇較簡單,直接轉(zhuǎn)接即可,;

2,、液體石蠟法保存的菌種在復蘇時,挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,,生長繁殖后,,再重新轉(zhuǎn)接一次;

3,、沙土管法保存菌種在復蘇時,,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,,長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次,。或取沙土粒于適宜的液體培養(yǎng)基中,,增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面,;

4、真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,,將安瓿管頂部燒熱,,用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,,頂部出現(xiàn)裂紋,,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,,用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,,使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上,進行適溫培養(yǎng),;

5,、-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復蘇時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,,應立即放置38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動,。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,約需50秒-100秒,。開啟安瓿管或塑料凍存管,,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)

6、液氮超低溫凍結(jié)法保存亮發(fā)光桿菌復蘇與-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復蘇相似,,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒,。開啟安瓿管或塑料凍存管,,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

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亮發(fā)光桿菌

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