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大部分elisa 檢測(cè)均以血清為標(biāo)本,。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血,，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色,。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng),。一般說(shuō)來(lái),，在5 天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG 聚合,，使間接法的試劑本底加深,。超過(guò)一周測(cè)定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡,?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè),。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存,。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,，也可加入適當(dāng)防腐劑。抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽(yáng)性,，建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑,。具體注意事項(xiàng)：

1) 要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),，其有類似過(guò)氧化物的活性,，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中,，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色,。

2) 樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,，一則細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾,。

3) 血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離,，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作,，則建議冰凍保存,。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在-70℃以下,。

4) 冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融,。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外,，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,，不要進(jìn)行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可,。

5) 標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。