日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

elisa實驗中的封閉液小知識

ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn),，蔗糖封閉的原理：

1,、ELISA實驗中,，蔗糖本身沒有封閉作用;

2、封閉液一般是BSA,、酪蛋白等或者是Tween等,。

3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白,，起到“保護(hù)劑"的作用,。

4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時進(jìn)行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證,。但多數(shù)選擇前者。

封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),，0.4%的明膠,，但是實驗表明前者比較好，后者不容易洗干凈未結(jié)合上的明膠,。

封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結(jié)合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,，結(jié)合抗體或抗原的時候就不會產(chǎn)生非特異結(jié)合了，不會影響實驗的準(zhǔn)確度,。

tween的作用：雖然不能單獨(dú)封閉,，但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結(jié)合或結(jié)合不牢固的蛋白的作用，假如抗體包被在板上會出現(xiàn)YY-

附件：ELISA實驗中緩沖溶液等試劑的配置

ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),，ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,，把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?1)　ELISA實驗包被緩沖液(2)　ELISA實驗洗滌緩沖液(2)　ELISA實驗洗滌緩沖液(3)　ELISA實驗稀釋液;(4)ELISA實驗終止液(5)ELISA底物緩沖液(6)ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液(7)　ELISA實驗ABTS使用液(8)ELISC。

試劑

(1)　ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):

NaHCO3 1.59克

NaHCO3　 2.93克

加蒸餾水至1000ml

(2)　ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS)：0.15M

KH2PO4 　　　　 　0.2克

Na2HPO4·12H2O　　2.9克

NaCl　　　　　 　　8.0克

KCl　　　　　　　 　0.2克

Tween-20　0.05%　 0.5ml

加蒸餾水至1000ml

(3)　ELISA實驗稀釋液：

牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

加洗滌緩沖液至100ml

或以羊血清,、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用,。

(4)　ELISA實驗終止液(2M　H2SO4)：

蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml,。

(5)　ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):

0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml

0.1M 檸檬酸(19.2克/L)　　　　　 24.3ml

加蒸餾水50ml,。

(6)　ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:

TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml

底物緩沖液(PH5.5)　　　 10ml

0.75%H2O2 32μl

(7)　ELISA實驗ABTS使用液:

ABTS　　　　　　　　0.5mg

底物緩沖液(PH5.5)　 1ml

3%H2O2 2μl

(8)ELISA實驗封閉液：

牛血清白蛋白(BSA) 5克

加洗滌緩沖液至100ml。

值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,，不適合長期保存,。

生物幫推薦ELISA相關(guān)產(chǎn)品，詳情見：封閉試劑,、終止溶液,、封閉肽、ELISA稀釋液、ELISA試劑盒,、ELISA緩沖液,、ELISA洗脫緩沖液

為了保證ELISA實驗的準(zhǔn)確性，實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,，將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標(biāo)孔,，嚴(yán)防交叉污染。