近年來(lái),，隨著
多功能酶標(biāo)儀在國(guó)內(nèi)各高校實(shí)驗(yàn)室逐漸推廣開(kāi)來(lái),，多功能酶標(biāo)儀品牌和型號(hào)也逐漸多了起來(lái)，亂花漸欲迷人眼,。本文嘗試從用戶實(shí)際使用的角度,，探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性，希望能幫助大家找到真正合適自己的
多功能酶標(biāo)儀,。
一,、濾片Vs光柵
多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多，但zui簡(jiǎn)單的莫過(guò)于用他們的濾光方式來(lái)作分界線,。一般來(lái)說(shuō),，可以分為濾光片型和光柵型兩大類。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè),，還是想用光柵的時(shí)候用光柵,，該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可，另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的,。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,，并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
總體來(lái)說(shuō),，濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,，配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),，可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。
二,、雜光率&波長(zhǎng)準(zhǔn)確性
光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,，多家廠家共同努力，已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高,。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,，zui關(guān)鍵的無(wú)疑就是光柵的雜光率和波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性了。
雜光率指得就是光源通過(guò)光柵后,，得到的光線中,，“不需要”的波長(zhǎng)的光占所標(biāo)稱波長(zhǎng)的光的比例，表征了濾光的純度,。由于光線干涉,、衍射等的復(fù)雜性，無(wú)論使用濾光片還是光柵,，雜光都是不可避免的,。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來(lái)說(shuō),，濾光片型的雜光率在10-4——10-5之間,，光柵型的可以做到10-6——10-7。由于此類雜光是非特異的,，而且會(huì)直接進(jìn)入zui后的檢測(cè)器,，所以有多少的雜光就會(huì)引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測(cè)過(guò)程中,，由于檢測(cè)器存在放大效應(yīng),，雜光率的干擾也會(huì)被指數(shù)級(jí)放大。因此,，雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo),。
光柵的另一個(gè)重要指標(biāo)就是波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測(cè)是依賴于物質(zhì)在某個(gè)波長(zhǎng)的特征圖譜,。就像DNA/RNA的OD260濃度測(cè)定,，實(shí)際檢測(cè)波長(zhǎng)偏離260nm幾個(gè)nm以上的話，OD值與zui終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會(huì)發(fā)生改變,。因此,，一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng)，他的波長(zhǎng)選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5——1nm之間,。波長(zhǎng)偏離過(guò)大有時(shí)就會(huì)影響到zui終結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
這兩個(gè)可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)zui關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù)，直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測(cè)量的結(jié)果，是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的zui基本要求,。
三,、認(rèn)證>參數(shù)
在保證檢測(cè)可靠的基礎(chǔ)上，不同儀器的下一個(gè)差異就體現(xiàn)在檢測(cè)的靈敏度上面,，這時(shí)人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測(cè)到多弱的信號(hào),。
靈敏度涉及了整個(gè)光路系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和選料，很難說(shuō)某一個(gè)部件會(huì)起決定性作用,。但是有一點(diǎn),，在各種單功能檢測(cè)項(xiàng)目中，光吸收檢測(cè)用非放大型的光電二極管,、熒光檢測(cè)用光電倍增管,、發(fā)光檢測(cè)用專門(mén)設(shè)計(jì)的單光子計(jì)數(shù)光電倍增管，這三種不同的檢測(cè)器是各自檢測(cè)領(lǐng)域的優(yōu)先選擇,。
四,、比色杯+微量檢測(cè)
除了常規(guī)的6——384/1536孔酶標(biāo)板檢測(cè)之外,，有些儀器還附帶了比色杯,、微量檢測(cè)板等的兼容功能。無(wú)論是使用立式比色杯,、臥式比色杯還是各種微量檢測(cè)板,，其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測(cè)引入一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測(cè)也能通過(guò)光程校正等方式實(shí)現(xiàn)10mm光程O(píng)D值的換算,，但這只是一個(gè)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過(guò)程,，檢測(cè)誤差累積較多，實(shí)際使用效果不佳,。引入比色杯和微量檢測(cè)板后,，光吸收的檢測(cè)光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長(zhǎng)度，OD值換算更加簡(jiǎn)單和準(zhǔn)確,。附帶了此類檢測(cè)功能的酶標(biāo)儀,，相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測(cè)之外，還能替代部分分光光度計(jì)的功能,，使其功能更加全面,，儀器的性價(jià)比更高。
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