流式細(xì)胞儀(Flow cytometer )是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置,。它可以快速測(cè)量、存貯,、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理,、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來(lái),。多數(shù)流式細(xì)胞計(jì)是一種零分辨率的儀器,,它只能測(cè)量一個(gè)細(xì)胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標(biāo),,而不能鑒別和測(cè)出某一特定部位的核酸或蛋白的多少,。也就是說(shuō),它的細(xì)節(jié) 分辨率為零,。
BD 流式細(xì)胞儀中激光產(chǎn)生的光被樣品中的細(xì)胞散射,,由檢測(cè)器測(cè)量,然后轉(zhuǎn)換為可以分析和測(cè)量的信號(hào),。本設(shè)備所采用的技術(shù)是一種用于分析細(xì)胞的具有多種應(yīng)用的技術(shù),,包括細(xì)胞計(jì)數(shù)、表型分析,、細(xì)胞周期評(píng)估和生存力檢測(cè)等不同應(yīng)用,。
BD 流式細(xì)胞儀儀器主要由哪四個(gè)系統(tǒng)組成:
1.流動(dòng)室和液流系統(tǒng):
流動(dòng)室由樣品管,、鞘液管和噴嘴等組成。將懸浮分散的單細(xì)胞懸液,,經(jīng)特異性熒光染料染色后,,放入樣品管。在氣體壓力下,,樣品管中的單細(xì)胞懸液進(jìn)入BD 流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室,,鞘液約束細(xì)胞排列成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出,成為細(xì)胞液柱,。
2.光電管和檢測(cè)系統(tǒng):
細(xì)胞所產(chǎn)生的熒光通過(guò)光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號(hào)而進(jìn)行測(cè)量,。這些信號(hào)分別被成90℃角方向放置的光電倍增熒光檢測(cè)器和前向角放置的光電二極管檢測(cè)器接收,經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換為電子信號(hào),。
3.激光源和光學(xué)系統(tǒng):
經(jīng)特異熒光染色的細(xì)胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測(cè),。細(xì)胞液柱與水平方向的入射激光束垂直相交,相交點(diǎn)稱為測(cè)量區(qū),。通過(guò)測(cè)量區(qū)的細(xì)胞受激光照射后發(fā)出熒光,,同時(shí)產(chǎn)生光散射。
4.計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng):
經(jīng)轉(zhuǎn)換后的電信號(hào)被送往計(jì)算機(jī)分析器,。計(jì)算機(jī)通過(guò)相應(yīng)的軟件儲(chǔ)存,、計(jì)算、分析,,就可以得到細(xì)胞的大小和活性、核酸含量等理化指標(biāo),。
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