熒光光譜儀又稱熒光分光光度計(jì),，是一種定性,、定量分析的儀器,，主要用于測(cè)試光致發(fā)光的樣品的各種發(fā)光性質(zhì),。通過(guò)熒光光譜儀的檢測(cè),，可以獲得物質(zhì)的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜,、量子產(chǎn)率,、熒光強(qiáng)度、熒光壽命,、斯托克斯位移,、熒光偏振與去偏振特性，以及熒光的淬滅方面的信息,。

熒光光譜儀主要包括光源,、激發(fā)單色器,、樣品池,、熒光單色器及檢測(cè)器等部件。

1．光源

早期的熒光分光光度計(jì),，配有能發(fā)生很窄汞線的低壓汞燈,。使用高壓汞燈，譜線被加寬,，而且也存在高強(qiáng)度的連續(xù)帶,。然而，一個(gè)完整的激發(fā)光譜的測(cè)定需一種能發(fā)射從可見到紫外范圍的較高強(qiáng)度的光輻射的燈,。氙弧燈能適于此條件,，因此，它是目前在熒光分光光度計(jì)中zui廣泛使用的光源。

2．單色器

單色器的作用是把光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解成單色光,，并能準(zhǔn)確方便地“取出”所需要的某一波長(zhǎng)的光,，它是光譜儀的心臟部分。單色器主要由狹縫,、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成,，其中色散元件是關(guān)鍵部件。色散元件是棱鏡和反射光柵或兩者的組合,，它能將連續(xù)光譜色散成為單色光,。

（1）棱鏡單色器

棱鏡單色器是利用不同波長(zhǎng)的光在棱鏡內(nèi)折射率不同將復(fù)合光色散為單色光的。棱鏡色散作用的大小與棱鏡制作材料及幾何形狀有關(guān),。常用的棱鏡用玻璃或石英制成,。可見分光光度計(jì)可以采用玻,，它適用于紫外,、可見整個(gè)光譜區(qū)。

（2）光柵單色器

光柵作為色散元件具有不少*的優(yōu)點(diǎn),。光柵可定義為一系列等寬,、等距離的平行狹縫。光柵的色散原理是以光的衍射現(xiàn)象和干涉現(xiàn)象為基礎(chǔ)的,。常用的光柵單色器為反射光柵單色器,，它又分為平面反射光柵和凹面反射光柵兩種，其中zui常用的是平面反射光柵,。光柵單色器的分辨率比棱鏡單色器分辨率高（可達(dá)±0.2nm）,，而且它可用的波長(zhǎng)范圍也比棱鏡單色器寬，且入射光80%的能量在一級(jí)光譜中,。近年來(lái),，光柵的刻制復(fù)制技術(shù)也在不斷地改進(jìn)，其質(zhì)量也在不斷的提高,，因而其應(yīng)用日益廣泛,。

（3）狹縫

狹縫是單色器的重要組成部分，直接影響到分辨率,。狹縫寬度越小,，單色性越好，但光強(qiáng)度也隨之減少,。

3．樣品池

熒光儀用的樣品池需用低熒光的材料制成,，通常用玻璃和石英材料，形狀以方形和長(zhǎng)方形為宜,。

4．檢測(cè)器

主要有硒光電池,、光電管和光電倍增管等,。目前來(lái)說(shuō)由于熒光的強(qiáng)度較弱，一般以光電倍增管作檢測(cè)器,。選擇光電倍增管要考慮響應(yīng)波長(zhǎng),、靈敏度和噪聲水平等。藍(lán)敏管對(duì)蛋白質(zhì),、核酸的測(cè)量適用,，而紅敏管則適用于熒光染料檢測(cè)。