詳細介紹
Phos-tag™ 生物素
無特異性磷酸化抗體時的理想選擇,!
Phos-tag™ 生物素是與生物素結合的Phos-tag™,,可用于免疫印跡法檢測磷酸化蛋白。Phos-tag™ Biotin BTL-104和BTL-105可靈敏檢測PVDF膜上的磷酸化蛋白,。
◆原理
◆優(yōu)點,、特色
● 無輻射。
● 無需PVDF膜的封閉處理,。
● Phos-tag™ 的特異性結合與氨基酸種類,、序列無關,。
● 可適用于免疫印跡和質譜分析等后續(xù)工作。
● Phos-tag™ BTL母液可穩(wěn)定保存至少6個月,。
● 實驗流程與使用HRP標記抗體相類似,。
※BTL-104、BTL-105,、BTL-111三者連接鏈(Linker)長度不一,,但使用上基本相同。BTL-111靈敏度更高,。
◆案例,、應用
【使用例:在PVDF 膜上檢測磷酸化蛋白】
轉印在PVDF 膜上的磷酸化蛋白可精·確檢測到ng級水平,沒有檢測到相應的去磷酸化蛋白與非磷酸化蛋白的信號斑點,。
免疫印跡檢測磷酸化蛋白——Phos-tag ™ 生物素,。
摘自Eiji Kinoshita ,et al., Mol.Cel.Proteomics (2006) 5: 749
【使用例:Phos-tag™ 生物素在檢測蛋白激酶活性的微陣列(生物芯片)中的運用】
蛋白激酶是很多疾病診斷和藥物篩選的靶標。近來有科研人員研發(fā)了一種檢測胞內蛋白激酶活性的高靈敏度多肽微陣列,。用微陣列點樣機點樣2nL體積的底物多肽溶液,,使多肽固定在戊二醛預修飾的高氨基末端載玻片。
當多肽經細胞裂解液磷酸化后,,用熒光標記的抗phosphotyrosine(磷酸化酪氨酸)抗體檢測酪氨酸激酶,,或者用Phos-tag™ 生物素,接著用熒光標記的親和素檢測絲氨酸或者蘇氨酸激酶,。之后用自動微陣列掃描儀檢測熒光信號,。多肽微陣列系統(tǒng)包括簡單的多肽固定,只需少量樣品,,具有高密度陣列,。重要的是,檢測細胞裂解液蛋白激酶活性的靈敏度高,。
因此多肽微陣列系統(tǒng)可用于高通量篩選細胞內激酶活性,,可用于藥物篩選和疾病診斷。
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
301-93531 | Phos-tag 生物素 | 10 mg |
308-97201 | Phos-tag 生物素1mM水溶液 | 0.1 mL |
Phos-tag™ 生物素