硅膠珠型microRNA分離試劑盒
富士膠片和光提供能使從Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)化的“microRNA純化試劑盒”系列,。使用本系列試劑盒能簡(jiǎn)便地從人和小鼠的細(xì)胞或組織中提取Ago蛋白結(jié)合的microRNA以及靶mRNA,還能從培養(yǎng)上清,、血清,、血漿中提取游離Ago蛋白結(jié)合的microRNA。所提取到的RNA可以應(yīng)用于qPCR,、微陣列檢測(cè),、NGS等下游實(shí)驗(yàn)。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA純化試劑盒,,以及采用了硅膠珠法的microRNA純化試劑盒,。

microRNA純化試劑盒抗Ago抗體固定珠子具有非特異吸附性低的特征,它采用二氧化硅基聚合物珠粒,,以離心為基礎(chǔ)進(jìn)行免疫沉淀操作,。在從免疫沉淀后的硅膠珠中提取RNA的步驟時(shí),,采用苯酚/CHCl3提取(P/C法)及乙醇沉淀來(lái)提取RNA,。富士膠片和光推出含有固定了抗Ago1抗體(2A7),、抗人Ago2抗體(4G8)、抗小鼠Ago2抗體(2D4),、抗人Ago3抗體(1C12)的硅膠珠的4種試劑盒,。
◆操作示意圖

◆試劑盒使用實(shí)例
用microRNA純化試劑盒,人Ago2通過(guò)Urea-PAGE分離從三種5×106 cells的人培養(yǎng)細(xì)胞株(HeLa,、HepG2,、HEK293),和小鼠培養(yǎng)細(xì)胞株(P388D1)中提取的microRNA組分,,再進(jìn)行銀染(311-03961,、CLEAR STAINAg、20 tests)檢測(cè),。結(jié)果表明能從人培養(yǎng)細(xì)胞中特異性提取microRNA(圖1),。以同樣的銀染試劑,檢測(cè)用microRNA純化試劑盒,,小鼠Ago2從5×106 cells的人培養(yǎng)細(xì)胞(HeLa)和嚙齒動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞株(P388D1,、CHO、PC-12)中提取的microRNA組分,。結(jié)果表明,,能從三種嚙齒動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞株中特異性提取microRNA而不能從人細(xì)胞株中提取(圖2),。

圖1.通過(guò)用人Ago2提取的microRNA的進(jìn)行銀染檢測(cè)

圖2. 對(duì)小鼠Ago2提取的microRNA的進(jìn)行銀染檢測(cè)
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 使用抗體克隆號(hào) | 對(duì)應(yīng) 物種 | 對(duì)應(yīng)樣本 | 提取RNA | IP B/F 分離法 | RNA提取法 |
291-70201 | microRNA純化試劑盒,,人/鼠Ago1 | 2A7 | 人、小鼠 | 細(xì)胞/組織 | microRNA 靶標(biāo)mRNA | 離心 | P/C 法 (苯酚/CHCl3法) |
292-66701 | microRNA純化試劑盒,,人Ago2 | 4G8 | 人,、猴、狗 |
292-67301 | microRNA純化試劑盒,,小鼠Ago2 | 2D4 | 小鼠,、 大鼠 |
297-70301 | microRNA純化試劑盒,人Ago3 | 1C12 | 人 |
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