色譜柱是液相的心臟,，在液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效,、容量和滲透性,，延長(zhǎng)柱子的使用壽命是非常重要。色譜柱壓力過(guò)高,、過(guò)低都屬于柱壓?jiǎn)栴}。色譜柱壓升高一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了雜質(zhì),，造成流體阻力加大所致,。我們的色譜工程師大致總結(jié)為以下幾個(gè)方面：

1、流動(dòng)相的前處理：流動(dòng)相或楊平中雜質(zhì)堵塞色譜柱進(jìn)口濾片,，導(dǎo)致壓力升高,。這是由于流動(dòng)相可能沒(méi)有過(guò)濾，或過(guò)濾不*,，使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所致,。另一個(gè)方面也可能沒(méi)有使用預(yù)保護(hù)柱所致,。

2、樣品的沉淀：當(dāng)流動(dòng)相與溶解樣品的溶劑不一致時(shí),，樣品進(jìn)入色譜柱時(shí),，可能因溶解度降低而沉淀出來(lái)吸附于柱內(nèi)，造成壓力升高,。

3,、晶體的析出：使用含有緩沖液的流動(dòng)相時(shí)，緩沖液中的無(wú)機(jī)鹽可能會(huì)殘留在體系之中,，它們會(huì)因在新流動(dòng)相中的溶解度降低而析出阻塞而壓力升高,。

4、細(xì)菌或霉菌孳生：流動(dòng)相中,、管路中或柱子進(jìn)口處繁殖,、生長(zhǎng)霉菌堵塞濾板，導(dǎo)致壓力升高,。所以在使用磷酸鹽緩沖液時(shí)一般要現(xiàn)配現(xiàn)用,。

 5、溶質(zhì)吸附：一些溶質(zhì)在色譜柱上有較強(qiáng)大的吸附力,，洗脫時(shí)流動(dòng)相也難以清除掉,，累積的未洗脫溶質(zhì)也會(huì)造成阻力增大從而造成壓力升高。

 6,、流動(dòng)相更換過(guò)度較快：當(dāng)改變流動(dòng)相體系時(shí),，不*的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動(dòng)相存在于同一個(gè)體系之中,，也會(huì)造成壓力升高,。 

7、壓力脈沖：運(yùn)行過(guò)程中,，有時(shí)會(huì)產(chǎn)生整個(gè)液相色譜儀系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降,。如泵壓力變化，此所形成的壓力脈沖會(huì)造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化,，填料微屑的長(zhǎng)期積累也可能會(huì)使柱床阻力增大,，造成壓力升高。

    以上幾種出現(xiàn)液相色譜儀柱壓升高的原因,，我們的色譜工程師提出解決方法：

    處理對(duì)于緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi)的情況先用40～50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應(yīng)提高流速?zèng)_洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘,；如果柱壓還是降不下來(lái)，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上,，用流動(dòng)相沖洗柱子,。這時(shí)，如果柱壓仍不下降,，只有換柱子入口篩板,，但一旦操作不甚,，很容易造成柱效下降，所以盡量少用,。

   對(duì)于樣品污染沉積的情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品污染的情況而定),再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上,。

   液相色譜儀柱壓過(guò)低的現(xiàn)象一般是由于色譜系統(tǒng)泄漏造成的，其處理方法：尋找各個(gè)接口處,，特別是色譜柱兩端的接口,，把泄漏的地方旋緊即可。

    另外還有一中可能是柱壓不穩(wěn),，忽高忽低,，更嚴(yán)重一點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致泵無(wú)法吸上液體，原因就是泵里進(jìn)了空氣,。處理方法：打開(kāi)Purge閥,，用3-5ml/min的流速?zèng)_洗，如果不行,，則要用針筒在排空閥處借助外力吸出氣泡,。