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茶多酚(TP)檢測(cè)試劑盒(酒石酸鐵比色法)說明書

時(shí)間:2025/2/28閱讀:369
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

茶多酚(Tea Polyphenols,,TP)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類,、花色苷類,、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,,兒茶素占60~80%, 具有 C6-C3-C6 碳骨架結(jié)構(gòu),,是一種重要的天然抗氧化物質(zhì),,能夠清除自由基。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,,是形成茶葉色香味的主要成份之一,,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一,研究表明茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用,,能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓,,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。

茶多酚(TP)檢測(cè)試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測(cè)原理是以酒石酸鐵為底物,,利用茶多酚與酒石酸鐵反應(yīng),,生成穩(wěn)定紫藍(lán)色化合物,以分光光度計(jì)540nm 處測(cè)定吸光度,在一定范圍內(nèi)吸光度與顏色深淺的變化成正比,,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進(jìn)而計(jì)算茶多酚含量,,主要用   于測(cè)定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,,尤其適用于測(cè)定茶葉中茶多酚含量,。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途,。

操作步驟(僅供參考):

1,、準(zhǔn)備樣品:

①植物樣品:取 0.2g 植物組織,研磨成粉末,,加入煮沸的蒸餾水10ml,,沸水浴浸提20min,用200 目細(xì)胞篩過濾,,濾渣再繼續(xù)置于新的煮沸的10ml 蒸餾水,,相同操作提取一次,合并兩次濾液,,5000r/min 離心15min,,取上清液,即為茶多酚提取液,,4℃避光保存,,用于茶多酚的檢測(cè);綠茶等液體樣本可直接用該試劑盒測(cè)定,。

②血漿,、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用本試劑盒測(cè)定,。

③細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,,如有必要可用蒸餾水進(jìn)行適當(dāng)勻漿,5000r/min 離心 15min,,取上清液,,即為茶多酚提取液,4℃避光保存,。

高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,,可以使用蒸餾水進(jìn)行適當(dāng)稀釋。

2,、配制系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn):用蒸餾水和茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),,按下表進(jìn)行操作,依次稀釋,。


加入物(μl)

1

2

3

4

5

6

茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

10

25

50

150

250

400

蒸餾水

490

95

450

350

250

100

相當(dāng)于茶多酚含量(μg/ml)

20

50

100

300

500

800


,、3.TP 加樣:按照下表設(shè)置空白管,、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管,,溶液應(yīng)按照順序依次加入,,并注意避免產(chǎn)生氣泡;如果樣品中的 TP 濃度過高,,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行管,求平均值,。

加入物(ml)

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測(cè)定管

蒸餾水

0.5

0.25

0.25

系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1~6 號(hào))

0.25

待測(cè)樣品

0.25

TP 顯色液

0.5

0.5

0.5

TP Assay Buffer

1.5

1.5

1.5

4,、TP 測(cè)定:以空白調(diào)零,比色杯光徑 1.0cm,,分光光度計(jì)測(cè)定 540nm 處標(biāo)準(zhǔn)管,、測(cè)定管的吸光度。

計(jì)算:

以系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(1~6 號(hào))(20,、50、100,、300,、500、800μg/ml)為橫坐標(biāo),, 以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得回歸方程,。以測(cè)定管吸光度代入回歸方程求得提取液中 TP 含量,。



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