產(chǎn)品簡介：

鈣在人體內(nèi)大量存在，構(gòu)成骨骼作為支持人體的支架,，在分泌,、運(yùn)送、肌肉收縮,、神經(jīng) 傳導(dǎo)等也起重要作用,，鈣在機(jī)體內(nèi)以兩種形式存在，一種是離子鈣,，存在血液循環(huán)內(nèi),，即所謂血鈣；另一種是結(jié)合鈣,，和蛋白,、碳酸或磷酸結(jié)合而沉著在組織內(nèi)，除骨骼和牙齒外正常時鈣滲透在所有組織和細(xì)胞中,，一般不以固體狀態(tài)出現(xiàn)在組織內(nèi),，但在某些情況下鈣析出成固體并沉著于組織內(nèi)，則為病理性鈣鹽沉著,，沉著的鈣鹽主要是磷酸鈣,，其次為碳酸鈣。鈣鹽通常是單折射的,，但草酸鈣是雙折射的,，當(dāng)使用 HE 染色時鈣一般呈紫藍(lán)色，許多染料可以于鈣形成螯合物,，包括茜素紅 S,、紅紫素、核固紅等,，茜素紅 S 屬一種蒽醌類衍生物,，是茜素磺酸鈉鹽，它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物,。

鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅 S 法,，鈣鹽染色液(Von Kossa 銀法)又稱馮庫薩染色液，屬金屬置換法,，其原理在于 Von Kossa 銀溶液作用于含有不溶性鈣鹽的切片時,， 鈣被銀置換，銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀,，適用于大量樣本的鈣鹽組織染色,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,，不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料：

1,、10%中性福爾馬林固定液

2,、系列乙醇

3、蒸餾水

操作步驟(僅供參考)：

一,、常規(guī)染色

1、組織固定于 10%中性福爾馬林固定液,，常規(guī)脫水包埋,。

2、切片厚度 3~5um,，常規(guī)二甲苯或脫蠟透明液脫蠟至水,，蒸餾水洗。

3,、切片入 Von Kossa 銀溶液,，強(qiáng)光照射 15~60min(見注意事項(xiàng) 2)，蒸餾水洗 1min,。

  4,、入海波溶液處理 2min，HE 染色液或 Van Gieson 復(fù)染細(xì)胞核 1min,。

5,、常規(guī)脫水，二甲苯或脫蠟透明液透明,，中性樹膠封固,。

二、不溶性鈣染色

1,、組織固定于 10%中性福爾馬林固定液,，常規(guī)脫水，注意在 95%乙醇中脫水應(yīng)充分,。

2,、塑料包埋，室溫過夜,，37℃烤箱中聚合 2~4 天,，-20℃冰箱冷卻 15~20min。

3,、切片厚度 3~5μm,，未脫鈣骨切片脫塑至水，蒸餾水洗,。

4,、切片入 Von Kossa 銀溶液,，強(qiáng)光照射 10~60min(見注意事項(xiàng) 2)，蒸餾水洗,。

5,、入海波溶液處理 2min，HE 染色液,、中性紅或 Van Gieson 復(fù)染細(xì)胞核 1min,。

6、常規(guī)脫水,，二甲苯或脫蠟透明液透明,，中性樹膠封固。

染色結(jié)果：

陰性對照：如有必要,，可做陰性對照,。取另外一張連續(xù)切片脫蠟(脫塑)至水，置于Von Kossa對照液處理10~20min,，蒸餾水沖洗,，與試驗(yàn)片一同入Von Kossa 銀溶液，余下步驟同上,，結(jié)果為陰性,。 

注意事項(xiàng)：

1、鈣鹽組織固定以中性福爾馬林為佳,，不宜采用Bouin 液等酸性固定液和甲醛鈣固定液,；如用常規(guī)的10%福爾馬林固定，固定4～6h 后即可進(jìn)行脫水包埋,，以防止固定液酸化導(dǎo)致鈣鹽溶解,。

2、作用時間取決于陽光照射時光的強(qiáng)度和時間,；如暴露于強(qiáng)光下 15min 已經(jīng)足夠,；如暴露于紫外燈下10min 即可；如暴露于一般光線下,，宜適當(dāng)延長曝光時間,。

3、如果鈣鹽染色過深,，可用蒸餾水適當(dāng)稀釋 Von Kossa 銀溶液或減少光照時間或光照強(qiáng)度,；如果鈣鹽染色較淺，應(yīng)增加 Von Kossa 銀溶液用量并增加光照時間和光照強(qiáng)度,。

4,、該染色法可以區(qū)分尿酸鹽和鈣鹽，其原理在于鈣鹽不溶解于碳酸溶液，尿酸鹽易溶解于酸鋰溶液,，切片經(jīng)鋰處理后入VonKossa 銀溶液并置于強(qiáng)光下尿酸鹽呈陰性反應(yīng),。

有效期：12個月有效；4℃運(yùn)輸,，4℃保存,。