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葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)

時間:2018/7/9閱讀:3424
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葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)

產(chǎn)品簡介:

    葉綠體(Chloroplast)是光合作用的細(xì)胞器,,在光合作用研究中,常需要用提取的葉綠體展開下游研究工作,。葉綠體中所含的色素主要有兩大類,,葉綠素(包括葉綠素 a 和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素),它們與類囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合,,成為色素蛋白復(fù)合體,,其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll)。

葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)檢測原理是葉綠素不溶解于水,,而溶于有機(jī)溶劑,,以有機(jī)溶劑粗提葉綠素,根據(jù)朗伯-比爾定律,,某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質(zhì)濃度(C)和液層厚度(L)成正比,,即A=αCL,其中α為比例常數(shù),,當(dāng)溶液濃度以百分比濃度為單位,,層液厚度為1cm 時,α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。在本試劑盒情況下,,葉綠素a和葉綠素b在 665nm,、649nm處有大吸收波,根據(jù)經(jīng)驗公式可計算出葉綠素 a,、葉綠素b及總?cè)~綠素含量,。該試劑盒主要用于植物組織中葉綠素的提取以及定量檢測葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,,不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成:

   產(chǎn)品組成

   規(guī)格

Storage

試劑(A): Chlorophyll Assay buffer

   500ml

RT

試劑(B): 提取粉劑

3g

RT

使用說明書

          1份

自備材料:

1,、研缽或勻漿器

2,、離心管

3、濾紙或紗布

4,、比色杯

5,、分光光度計
操作步驟(僅供參考):

1、葉綠素提?。?/span>

①取菠菜或其他植物新鮮葉片,,洗凈,擦干,,去中脈,,稱取剪碎的新鮮樣品 0.1g,置于研缽或勻漿器,,加入少量提取粉劑(約 50mg)和 1mlChlorophyll Assay buffer,,研磨或勻漿成液態(tài)。

②將研磨液或勻漿液轉(zhuǎn)移至 10ml 離心管,,用少量葉綠素提取液沖洗研缽或勻漿器數(shù)次,,后連殘渣一同倒入 10ml 離心管,補(bǔ)加 Chlorophyll Assay buffer 至 10ml,,混勻,,避光放置 5min-2h。

③觀察底部組織殘渣接近于白色,,即為提取*,,如果仍有較多組織顏色,應(yīng)再加入Chlorophyll Assay buffer 繼續(xù)避光放置,。

④濾紙或三層紗布過濾,,留取濾液,即為葉綠素粗提液,。

2,、分光光度計測定:取葉綠素粗提液加入光徑為 1cm 的比色杯,以 Chlorophyll Assay buffer 調(diào)零,,測定粗提液在 665nm,、649nm 處吸光度(A665、A649),。

計算:

葉綠素 a 含量(mg/g)=Ca×V×N/(W×1000)

葉綠素 b 含量(mg/g)=Cb×V×N/(W×1000)

總?cè)~綠素含量(mg/g)=CT×V×N/(W×1000)

式中:Ca=13.95×A665-6.88×A649

Cb=24.95×A649-7.32×A665

CT=6.63×A665-18.07×A649

V=葉綠素粗提液體積(ml)=10(ml)

N=稀釋倍數(shù)

W=樣品鮮重或干重(g)

注意事項:

1,、 為了避免葉綠素見光分解,操作時應(yīng)盡量避光,,研磨或勻漿時應(yīng)盡量縮短時間,。

2、 測定吸光度值大于 1 時,,可適當(dāng)稀釋后再行測定,。

3、 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

有效期:12個月有效。

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