biocolor 膠原檢測(cè)試劑盒
【簡(jiǎn)單介紹】
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【詳細(xì)說(shuō)明】
Biocolor 可溶性膠原檢測(cè)試劑盒
Biocolor Sircol Soluble Collagen Assay
biocolor 膠原檢測(cè)試劑盒采用與膠原特異性結(jié)合的Sircol染料,,主要用于定量檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織中抽提的酸溶性膠原和體外培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞釋放到培養(yǎng)基中的膠原,。
溶于酸、胃蛋白等的可溶性膠原均可檢測(cè),,具體可檢測(cè)的膠原類型為I-V型,,VI-XIV型膠原也可檢測(cè),但由于難以制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,,還無(wú)法定量,。Sircol染料不能區(qū)分不同類型的膠原,但可與膠原的[Gly-X-Y]n螺旋結(jié)構(gòu)特異性地結(jié)合,。隨著膠原變性為凝膠,,該染料與膠原的結(jié)合力減弱。非脊椎動(dòng)物與膠原由于變性溫度較低,、羥脯氨酸殘基較少等原因,,結(jié)合染料的能力較弱,需要制備種屬特異性的純化標(biāo)準(zhǔn)品,,以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.待測(cè)樣本的制備:取50ul樣本容易調(diào)整體積到100ul進(jìn)行反應(yīng),。根據(jù)反應(yīng)的結(jié)果對(duì)樣本濃度進(jìn)行調(diào)整,,使其在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi);
3.膠原—染料復(fù)合物的獲得:加入1ml Sircol染料,,混勻離心后,,既得膠原—染料復(fù)合物,,棄 上清,去掉未結(jié)合的染料
4.加入1ml 染料釋放劑,,將膠原—染料復(fù)合物中的染料釋放出來(lái)
5.吸光度測(cè)定:用分光光度計(jì)540nm出定量測(cè)定,。或使用colorimeter測(cè)定
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Product Code: S1000 110 assays
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