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菌種保藏是指保持微生物菌株的活力和遺傳性狀的技術(shù),。微生物在使用和傳代過程中容易發(fā)生污染,、變異甚至死亡，因而常常造成菌種的衰退,。菌種保藏的目的就是使菌株存活,、不丟失、不污染雜菌,、不發(fā)生或少發(fā)生變異,，保持菌種原有的活性和各種特征。菌種保藏的基本原理是使微生物的生命活動(dòng)處于半休眠狀態(tài),，也就是將微生物的新陳代謝作用限制在低范圍內(nèi),。

菌種保藏的方法很多，但原理大同小異,。
首先要挑選優(yōu)良純種,。利用微生物的孢子、芽孢及營養(yǎng)體,；
其次,，根據(jù)其生理,、生化性，人為創(chuàng)造低溫,、干燥或缺氧等條件,，抑制微生物的代謝作用，使其生命活動(dòng)降低到極低的程度或處于休眠狀態(tài),，從而延長菌種生命以及使菌種保持原有的形狀,，防止變異。不管采用哪種保藏方法,，在菌種保存過程中要求不死亡,、不污染雜菌和不退化。
短期：斜面保藏
斜面保藏是目前常用的短期保藏法,，操作簡單,，使用方便，但需定期接種,。因此工作量較大,，而且傳代次數(shù)多易發(fā)生變異，因此,，僅適用于短期經(jīng)常使用的菌種,。
1. 配制培養(yǎng)基，營養(yǎng)成分濃度稍低為宜,，特別是糖類盡可能降低,，產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)添加少量碳酸鈣,；
2. 斜面裝液量,，斜面以傾斜后不超過試管長度1/2為宜；
3. 斜面培養(yǎng),，溫度較最適稍低,，時(shí)間較最適略長；
4. 生長完成后,，密封置于2~8℃的低溫培養(yǎng)箱中保藏,。每傳代一次，霉菌,、放線菌及有芽孢的細(xì)菌可保存1~3個(gè)月,，酵母菌2個(gè)月，細(xì)菌1個(gè)月,。
活化使用：
將斜面從低溫培養(yǎng)箱中取出,，細(xì)菌挑取菌落增菌，或霉菌切塊傳代培養(yǎng),，培養(yǎng)好即可使用,。

長期：冷凍保藏
冷凍保藏是目前使用較為廣泛的長期保藏法之一,，適用于所各類微生物，較之于斜面保藏,，減少了工作量,，延長了保藏時(shí)間。
1. 準(zhǔn)備斜面或平板新鮮培養(yǎng)物一個(gè),，10%的無菌甘油溶液,；
2. 用甘油溶液將菌體或孢子洗脫下來，形成菌懸液,；
3. 菌懸液分裝,，凍存管裝液1mL/支，后置于程序降溫盒,；
4. 將程序降溫盒置于-80℃冰箱凍存,；
5. 可保藏1-2年。
活化使用：
1. 將凍存菌株置于凍存盒中取出,，準(zhǔn)備水浴溶解,，切勿常溫融化；
2. 將菌株迅速置于水浴速溶,，細(xì)菌40℃,，真菌30℃，約 2min全部溶解后接種到適宜培養(yǎng)基,；
3. 采用適宜條件培養(yǎng)完成即可,。