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       一,、實材料及試劑

       培養(yǎng)板,、酒精燈、移液槍,、CO2培養(yǎng)箱,、顯微鏡等MC3T3-E1（前成骨細

       二、實驗內(nèi)容

       試驗方法：將MC3T3-E1（前成骨細胞）細胞接種于含MEM-α培養(yǎng)基（10%胎牛血清,，1%青鏈霉素）的培養(yǎng)瓶內(nèi),，放置于二氧化碳培養(yǎng)箱（37℃,，5%CO2，潮濕）培養(yǎng),，每三天更換一次培養(yǎng)液,，待細胞鋪滿瓶底的80%以上時，用胰蛋白酶消化,，加入MEM-α培養(yǎng)基（10%胎牛血清,，1%青鏈霉素），將細胞吹打下來并吸取到10 mL離心管中,，離心,，棄上清，注意不要碰到管口,，加入MEM-α培養(yǎng)基（10%胎牛血清,，1%青鏈霉素）重懸，將細胞按照每孔1.2×105個細胞數(shù)接種于六孔板中,，實驗組加含誘導(dǎo)劑（50ug/mL抗壞血酸和10mmol/Lβ-甘油磷酸鈉）的培養(yǎng)液,，對照組用常規(guī)培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，每三天更換一次培養(yǎng)液,。

       三,、注意事項

       1、實驗操作過程中要避免污染,。
       2,、消化時間不宜過長。
       3,、誘導(dǎo)后細胞易脫壁,，換液操作要盡可能輕。