超液相色譜(UPLC®)簡介
UPLC原理基礎(chǔ)
隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,,液相色譜用戶對液相色譜技術(shù)的要求也不斷提高,他們需要“更快地得到更好的結(jié)果”,。因此超液相色譜(UltraPerformance LC®)概念的提出也就十分自然,;簡單的說:UPLC是用HPLC的極限作為自己的起點,把分離科學(xué)推向一個新領(lǐng)域,。
沃特世公司引入UPLC的概念是由研究的van Deemter 方程式及其曲線開始,。
由van Deemter曲線可以得到以下幾點啟示:
首先,顆粒度越小柱效越高;其次,不同的顆粒度有各自*柱效的流速,;zui后,更小的顆粒度使zui高柱效點向更高流速(線速度)方向移動,,而且有更寬的線速度范圍,。所以降低顆粒度不但能提高柱效,同時還能提高分析速度,。
使用更高的流速會受到色譜柱填料耐壓及儀器耐壓的限制,。反之;如果不用到*流速,,小顆粒度填料的高柱效就無法體現(xiàn),。
此外,;更高的柱效需要更小的系統(tǒng)體積(死體積)、更快的檢測速度等一系列條件的支持,,否則小顆粒度填料的高柱效同樣無法充分體現(xiàn),。
因此;要真正創(chuàng)建一個全新的分離科學(xué)領(lǐng)域 - UPLC,,必須解決以下幾個問題:
1. 大幅度提高色譜柱的性能:*要解決小顆粒填料的耐壓問題,,第二要解決小顆粒填料的裝填問題,包括顆粒度的分布以及色譜柱的結(jié)構(gòu),。
2. 高壓溶劑輸送單元(超過15,000psi)
3. 完善的系統(tǒng)整體性設(shè)計,,降低整個系統(tǒng)的體積,特別是死體積,并解決超高壓下的耐壓及滲漏問題,。
4. 快速自動進(jìn)樣器,,降低進(jìn)樣的交叉污染
5. 高速檢測器;優(yōu)化流動池以解決高速檢測及擴(kuò)散問題
6. 系統(tǒng)控制及數(shù)據(jù)管理,,解決高速數(shù)據(jù)的采集,、儀器的控制問題
新型的色譜填料及裝填技術(shù)
UPLC分離只有在新型的、耐壓而且顆粒度分布范圍很窄的1.7µm顆粒填料合成出來之后才有可能實現(xiàn),。
色譜柱技術(shù)應(yīng)該涵蓋幾個方面的內(nèi)容:首先是填料的合成,,以得到高質(zhì)量的填料顆粒,包括:耐高壓,、耐酸堿等等,。其次是顆粒的篩選,選出顆粒度分布盡可能窄的填料,。zui后是裝填技術(shù),,以保證既能堵住顆粒不使其外流,又不至于引起反壓的大幅升高,。
沃特世公司的ACQUITY UPLC® BEH色譜柱使用了更嚴(yán)格的篩分技術(shù),使1.7µm填料的分布很窄,,并且使用了全新篩板(申請中)及其它色譜柱硬件(柱管及其連接件),在超過20,000psi的壓力下裝填,。沃特世公司為此安裝了一條新的色譜柱裝填生產(chǎn)線及新的測試設(shè)備,。因此;ACQUITY UPLC色譜柱的性能及質(zhì)量比目前的HPLC柱有了質(zhì)的飛躍,。
基于1.7 μm小顆粒技術(shù)的UPLC,,與人們熟知的HPLC技術(shù)具有相同的分離原理。不同的是:UPLC不僅比傳統(tǒng)HPLC具有更高的分離能力,,而且結(jié)束了人們多年來不得不在速度和分離度之間忍痛割舍的歷史,。使用UPLC可以在很寬的線速度、流速和高反壓下進(jìn)行的分離工作,,并獲得優(yōu)異的結(jié)果,。(見下圖)
UPLC用1.7μm顆粒提高了分離能力,,可以分離出更多的色譜峰,從而對樣品所能提供的信息達(dá)到了一個新的水平,。而且又極大地縮短了開發(fā)方法所需的時間,。
UPLC:HPLC的未來
UPLC可以更快的速度和更高的質(zhì)量完成以往HPLC的工作,沃特世將致力于豐富已有的UPLC產(chǎn)品,,現(xiàn)已推出了六種新的色譜柱,,包括:BEH C18、C8,、苯基和ShieldRP18,、 HILIC 及HSS T3。同時還有適應(yīng)UPLC使用的蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD),,進(jìn)一步擴(kuò)展了UPLC的應(yīng)用領(lǐng)域,。
我們確信:UPLC將對的實驗室產(chǎn)生持久而深刻的影響。
UPLC是HPLC的未來,。
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