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溶出性抗菌織物抗（抑）效果浸漬試驗(yàn)
1 原 理
將試樣和對(duì)照織物分別放于三角瓶中,，用含有肉湯培養(yǎng)基的試驗(yàn)菌懸液接種于試樣和對(duì)照織物上,，經(jīng)培養(yǎng)后，分別將培養(yǎng)前后試樣上的細(xì)菌洗下,，測定細(xì)菌的數(shù)量,，可計(jì)算出試樣上細(xì)菌減少的百分率。該方法適用于溶出性抗菌織物抗（抑）效果的檢測,。
2 實(shí)驗(yàn)器材
（1）實(shí)驗(yàn)菌株 金黃色葡萄球菌（ATCC 6538）
（2）試樣 在距試樣布邊 10cm 以上,、離布端 1m 以上部位,，剪取直徑為 5cm 的圓形試樣若干（需用試樣數(shù)量要根據(jù)纖維類別及織物織法而定,，以能吸收1ml 菌液且三角瓶中不留殘液為度）。另同法剪取對(duì)照織物若干,，取 3 份試樣和 2 份對(duì)照織物分別裝于三角瓶中,，蓋好瓶口，121℃ 15min滅菌備用
（3）肉湯培養(yǎng)基
（4）胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基
（5）磷酸鹽緩沖液（PBS,，0.03mol/L,，pH為7.2～7.4）
（6）恒溫水浴箱
（7）37℃培養(yǎng)箱
3 菌懸液的制備
用接種環(huán)將保存的菌種以劃線法接種到營養(yǎng)瓊脂平皿上，在 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h,，取平皿上典型的菌落移種到含肉湯培養(yǎng)基的三角瓶中,，在 37℃條件下培養(yǎng) 24h，用肉湯對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行系列稀釋,，使菌懸液的含菌量為 1×105cfu/mL～5×105cfu/mL,。
4 試驗(yàn)步驟
（1）分別取 1mL 菌懸液加在 3 份準(zhǔn)備好的三角瓶內(nèi)的織物上，確保其均勻分布,，且三角瓶中不留多余液,，封好瓶口，以防蒸發(fā),。
（2）分別在一個(gè)盛有試樣和對(duì)照織物的三角瓶中加入 100mL 緩沖液,，劇烈搖晃 1min 洗滌細(xì)菌,，取 1mL 做系列1 0倍稀釋，選適當(dāng)稀釋度以傾注法接種平皿,，作為“0”接觸時(shí)間樣品和對(duì)照織物上的細(xì)菌數(shù),。
（3）將另一個(gè)裝有接種試樣的三角瓶在 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 20h±2h，然后加入 100mL緩沖液,，劇烈搖晃 1min 洗滌細(xì)菌,，取 1mL 做系列10倍稀釋，選適當(dāng)稀釋度以傾注法接種平皿,，作為試驗(yàn)組,。
（4）試樣不接種菌懸液，在“0”接觸時(shí)間加入 100mL 緩沖液,，劇烈搖晃 1min 取樣,，接種平皿，作為陰性對(duì)照組,。
（5）另取1個(gè)裝有對(duì)照織物的三角燒瓶,，接種 1mL 菌懸液后，在 37℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h±2h,，然后加入 100mL 緩沖液,，劇烈搖晃 1min 洗滌細(xì)菌，取 1mL 做系列10倍稀釋,，選適當(dāng)稀釋度以傾注法接種平皿,，作為陽性對(duì)照組。
（6）將陰性和陽性對(duì)照樣本與試驗(yàn)組樣本一并放入 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,，計(jì)數(shù)菌落數(shù),。
（7）試驗(yàn)重復(fù)3次。
（8）結(jié)果計(jì)算
B或C或（B＋C）/2-A
抑菌率（%）= ×100
B或C或（B＋C）/2
試驗(yàn)組試樣上的細(xì)菌數(shù),； “0”接觸時(shí)間試樣上的細(xì)菌數(shù),；
“0”接觸時(shí)間對(duì)照織物上的細(xì)菌數(shù)；
如果“B”和“C”差別較大時(shí),，取較大值,；如果“B”和“C”差別不大時(shí)，取平均值,。
5 評(píng)價(jià)規(guī)定
“0”接觸時(shí)間對(duì)照織物的平均菌落數(shù)應(yīng)在 1×103cfu/mL～5×103cfu/mL,。 陰性對(duì)照應(yīng)無菌生長，陽性對(duì)照菌數(shù)比“0”接觸時(shí)間的菌數(shù)明顯增加,。 各次試驗(yàn)的抑菌率均≥50%,，即判定該樣片具有抗菌作用。
6 注意事項(xiàng)
對(duì)織物進(jìn)行染菌操作時(shí),，應(yīng)確保其均勻分布,，且三角瓶中不沾染或存留多余菌液,。 三角瓶內(nèi)的織物染菌后，應(yīng)將瓶口封好,，以防液體蒸發(fā),，造成細(xì)菌死亡。