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振蕩燒瓶試驗
1 原 理
在液體中通過快速長時間振蕩， 增加微生物與抗（抑）菌產(chǎn)品內(nèi)抑菌劑的接觸以顯示其抑菌作用,。試驗根據(jù)抑菌率大小判斷其是否具有抑菌能力。本試驗適用于對非溶出性抗（抑）菌織物的抗（抑）菌效果鑒定,。
2 實驗器材
（1）實驗菌株 金黃色葡萄球菌（ATCC 6538）,、大腸桿菌（8099）、白色念珠菌（ATCC 10231） 菌懸液的制備方法見2.1.2,。根據(jù)抑菌劑特定用途也可用其他菌懸液
（2）磷酸鹽緩沖液（PBS,，0.03mol/L，pH值7.2）
（3）振蕩搖床 （300r/min）
（4）三角燒瓶
（5）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,、胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（TSA）與沙堡瓊脂培養(yǎng)基
3 操作程序
（1）將抗菌物品剪切成 10mm×10mm 樣片,，稱取 0.75g 2份分別置入 250mL 的三角燒瓶中。
（2）在上述三角燒瓶中加入 70mL PBS和 5mL菌懸液,，使菌懸液在PBS中的濃度為1×104cfu/mL～5×104cfu/mL,。
（3）將三角燒瓶固定于振蕩搖床上，在作用溫度為 20℃～25℃ 的條件下,，以300r/min分別振搖 2min,、1h。吸取 1.0mL 用PBS作適當(dāng)稀釋至10-2,，作為試驗組振蕩前樣液,。
（4）分別吸取振蕩前和振蕩后樣液及適當(dāng)稀釋度的稀釋液各 1.0mL，以瓊脂傾注法接種平皿,，每個樣液接種2個平皿,，按照2.1.3規(guī)定的方法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù)。
（5）試驗同時設(shè)陰性對照樣片和不加樣片組,。對照樣片組以不含抗菌劑的材質(zhì),、大小相同的樣片代替抗菌樣片外， 其它操作程序均與實驗組相同,。 不加樣片組分別取 5mL菌懸液和 70mL PBS加入 250mL 三角燒瓶中,，混勻,，分別于振蕩前和振蕩后 1h，各取 1.0mL 菌懸液與PBS的混合液做適當(dāng)稀釋,。同上,，按2.1.3法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù)。
（6）以試驗同批次的稀釋液,、培養(yǎng)基分別設(shè)陰性對照,。
（7）試驗重復(fù)3次，按下式計算抑菌率
抑菌率=（樣品振蕩前平均菌落數(shù)-樣品振蕩后平均菌落數(shù)）/樣品振蕩前平均菌落數(shù)×100%
4 評價規(guī)定
（1）各次試驗陰性對照均應(yīng)無菌生長,。
（2）不加樣片組活菌計數(shù)在 1×104cfu/mL～5×104cfu/mL之間,， 且樣本振蕩前后平均菌落數(shù)差值在 10% 以內(nèi)， 試驗有效,。
（3）各次試驗中,，試驗樣片抑菌率與對照樣片抑菌率的差值菌＞26%， 即判定該產(chǎn)品具有抗菌作用,。
5 注意事項
振蕩前須將振蕩搖床上的三角燒瓶固定牢,，以免碰破。
試驗中,，在實驗誤差允許的范圍內(nèi),，如果試驗組和對照組出現(xiàn)振蕩后菌落數(shù)高于振蕩前 菌落數(shù)的情況，其抑菌率可按“0”計算,。