樣本采集:根據(jù)檢測(cè)需求,,采集合適的生物樣本,。例如,采集靜脈血用于血清或血漿樣本制備,,采集尿液,、唾液等其他生物液體樣本時(shí)遵循相應(yīng)的規(guī)范操作,。確保樣本采集過程規(guī)范,,避免污染和樣本量不足等問題,。
試劑盒準(zhǔn)備:從儲(chǔ)存環(huán)境中取出試劑盒,平衡至室溫(通常為 20℃ - 25℃),,同時(shí)準(zhǔn)備好移液器,、吸頭,、酶標(biāo)儀等實(shí)驗(yàn)器材,并檢查其性能是否正常,。
加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品,、待測(cè)樣本以及空白對(duì)照按規(guī)定體積準(zhǔn)確加入微孔板相應(yīng)孔中,輕輕振蕩混勻,,使樣本與固相載體上的物質(zhì)充分接觸,,然后在設(shè)定的溫度和時(shí)間條件下孵育。
洗板:孵育結(jié)束后,,棄去孔內(nèi)液體,,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,以徹di清除未結(jié)合的物質(zhì),,減少非特異性信號(hào)干擾,。每次洗滌后需將微孔板拍干,防止殘留液體影響后續(xù)反應(yīng),。
加酶標(biāo)物:向各孔加入適量酶標(biāo)物,,振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止:加入底物顯色液,,在避光條件下孵育,,待顏色變化至合適程度時(shí),,加入終止液終止反應(yīng),使反應(yīng)停止在最佳檢測(cè)狀態(tài),。
結(jié)果測(cè)定:立即使用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長(zhǎng)下測(cè)定各孔 OD 值,,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中目標(biāo)物的含量。
高靈敏度:能夠檢測(cè)到極低濃度的目標(biāo)物,,滿足對(duì)微量樣本或低表達(dá)水平生物標(biāo)志物的檢測(cè)需求,。
特異性強(qiáng):試劑盒中的抗體或抗原對(duì)目標(biāo)物具有高度特異性,與其他類似物質(zhì)交叉反應(yīng)極小,,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
重復(fù)性好:同一批樣本多次檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定,變異系數(shù)小,,為科研及臨床診斷提供可靠且可重復(fù)的數(shù)據(jù)支持,。
臨床診斷:用于輔助診斷多種疾病,如感染性疾病,、自身免疫性疾病,、腫瘤等,通過檢測(cè)相關(guān)生物標(biāo)志物的含量,,為醫(yī)生提供診斷依據(jù)。
疾病監(jiān)測(cè):跟蹤疾病的發(fā)展進(jìn)程和治療效果,,例如監(jiān)測(cè)腫瘤患者治療過程中腫瘤標(biāo)志物的變化,,以評(píng)估治療方案的有效性。
科研領(lǐng)域:在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中,,用于探究疾病的發(fā)病機(jī)制,、藥物研發(fā)過程中的藥效評(píng)估等。