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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒
貨號:D2400
規(guī)格:50T,、100T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復檢期 12 個月,,2℃-8℃保存時間更長 ,。
產(chǎn)品說明:
本試劑盒適合于從血清,、細胞上清,、淋巴液中提取 DNA 病毒基因組,不適合于 RNA 病毒基因組的提取,。使用本試劑盒提取的基因組 DNA 可用于各種常規(guī)操作,,包括酶切、PCR,、文庫構建,、Southern 雜交等實驗。
產(chǎn)品包裝:
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,,加入體積請參照瓶上的標簽,。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1,、 取病毒上清液 0.5ml,,12000rpm 離心 5min,盡量吸盡上清使用,,棄去沉淀,。
2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K,, 充分混勻,, 65℃消化 10-20min, 期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,。
3,、 向管中加入 500ul 結合液,充分混勻,。再向管中加入 400ul 無水乙醇,,充分混勻,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,,不影響DNA 的提取,,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,,靜置 2min。 (吸附柱的大容積為 750ul,,可分兩次加入,。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。 )
4,、 12000rpm 離心 2min,,棄廢液,將吸附柱放入收集管中,。
5,、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm 離心 1min,,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中。
6,、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,,12000rpm 離心 1min,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中,。
7、 12000rpm 離心 2min,,將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切,、PCR 等,。
8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,,向吸附膜中央懸空滴加 50ul-100ul 經(jīng) 65℃水浴預熱的洗脫液,,室溫放置 5min,12000rpm 離心 1min,。
9,、 離心所得洗脫液再加入吸附柱中, 室溫放置 2min,, 12000rpm 離心 2min,, 即可得到高質(zhì)量的病毒基因組 DNA。
注意事項:
1,、試劑盒拆封后,,蛋白酶K需放置-20℃保存。
2,、樣品應避免反復凍融,,否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降,。
3、若結合液中有沉淀,,可在37℃水浴中重新溶解再使用,,不影響效果。
4,、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,,體積過小會影響回收效率。洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,,若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)此范圍),,pH 值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應保存在-20℃,,以防DNA降解,。
5、DNA濃度及純度檢測:得到的基因組DNA片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關,。D 260 值為 1.0 相當于大約 50 ug/ml雙鏈DNA,、40 ug/ml單鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值應為 1.7-1.9,,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,,比值會偏低,,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低,。
6,、如果病毒含量過低,后提取的基因組DAN電泳可能無法檢測到,,但PCR等其他實驗還會有結果,。
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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨,。
2、部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預訂,,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3,、部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準,。
4,、每日訂單截止時間為16點整,,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨,。
5,、請辦理完貨款后,將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址,、姓名、等以傳真,、,、短信、等形式通知我們,。
運輸說明:
1,、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,,再用泡沫盒密封,,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實驗保駕護航,。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸,。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實驗保駕護航。
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