目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學>>RNA提取>> R1200總RNA提取試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/100T |
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貨號 | R1200 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 1. 樣品處理: a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨 |
貨號:R2000
規(guī)格:50T/100T
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑盒組成 | R2000-50 | R2000-100 |
蛋白酶 K | 1ml | 2ml |
洗柱液 | 50ml | 50ml×2 |
結(jié)合液 | 25ml | 50ml |
漂洗液 | 15ml | 30ml |
RNase free ddH2O | 15ml | 15ml×2 |
RNase free 吸附柱 | 50 個 | 100 個 |
RNase free 收集管(2ml) | 50 個 | 100 個 |
保存:室溫(15℃-25℃)干燥條件下可保存 12 個月,,更長時間的保存可置于 2℃-8℃。
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒適合于從血清,、細胞上清,、淋巴液中提取 RNA 病毒基因組,,不適合于細胞等組織內(nèi) RNA 病毒基因組的提取,。使用本試劑盒提取的基因組 RNA 可用于 RT-PCR 實驗。
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入一瓶新開啟的無水乙醇,,加入到離瓶口約 0.5-1cm 距離,,蓋好搖勻。所有離心步驟均在 2-8℃條件下進行,。
1,、 取病毒上清液 0.5ml,12000rpm 離心 5min,,盡量吸盡上清使用,,棄去沉淀(如無沉淀可省去此步)。
2,、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K,,充分混勻,65℃消化 10min,,期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,。
3、 吸附柱前處理: 從包裝中取出吸附柱,, 放入收集管中,, 加入 700ul 洗柱液, 室溫放置 2 分鐘,, 2-8℃ 12000rpm 離心 2min,,棄廢液,將吸附柱放入收集管中待用,。
4,、 向病毒上清中加入 500ul 結(jié)合液,充分混勻,。再向管中加入 400ul 無水乙醇,,充分混勻,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,,不影響 RNA 的提取,,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,靜置 2min,。 (吸附柱的大容積為 750ul,,可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心,。 )
5、 12000rpm 離心 2min,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中,。
6、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液( 使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),,12000rpm 離心 1min,,棄廢液,將吸附柱放入收集管中,。
7,、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中。
8,、 12000rpm 離心 2min,,將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切,、PCR 等。
10,、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,,向吸附膜中央懸空滴加 50ul-100ul 經(jīng) 65℃水浴預熱的 RNase freeddH2O,室溫放置 5min,,12000rpm 離心 2min,。即可得到高質(zhì)量的病毒基因組 RNA。
注意事項:
1,、經(jīng)常更換新手套,。因為皮膚經(jīng)常帶有細菌,可能導致 RNase 污染,。使用無 RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染,。
2、樣品應避免反復凍融,,否則會導致提取的 RNA 提取量也下降,。
3、若結(jié)合液中有沉淀,,可在 37℃水浴中重新溶解,。
4、如果樣品消化不*,,后面的離心步驟中可能會出現(xiàn)堵柱子的情況,,可適當延長離心時間,。
5、洗脫緩沖液的體積好不少于 50ul,,體積過小會影響回收效率,。
6、RNA 產(chǎn)物應保存在-70℃,,以防 RNA 降解,。
7、RNA 檢測:得到的基因組 RNA 片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關(guān),。由于病毒不含有核糖體RNA,, 所以常規(guī)電泳無法檢測, 只有后期實驗才可檢測到,。 D260值為1相當于大約40 μg/ml單鏈RNA,。
總RNA提取試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨,。
2、部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預訂,,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3,、部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準,。
4,、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨,。
5、請辦理完貨款后,,將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址、姓名,、等以傳真,、、短信,、等形式通知我們,。
運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,,再用泡沫盒密封,,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實驗保駕護航。
2,、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸,。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,,用膠帶嚴實密封泡沫盒,,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航,。
3,、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中,。
參考文獻:
《Roles of β-catenin, TCF-4, and survivin in nasopharyngeal carcinoma: correlation with clinicopathological features and prognostic significance》 作者:Pei-Ying Jin, Zi-Hui Zheng, Hong-Jie Lu, Jing Yan, Gui-Hong Zheng, Yuan-Lin Zheng, Dong-Mei Wu and Jun Lu 期刊:Cancer Cell International 影響因子:3.439 PMID:30867651