目錄:北京索萊寶科技有限公司>>核酸相關(guān)>>堿基與核酸>> 15596-026Invitrogen Trizol
TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細(xì)胞,,使細(xì)胞中的蛋白,,核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質(zhì),,但不能*抑制RNA酶活性,,因此TRIzol中還加入了8-羥基喹啉、異硫氰酸胍,、β-巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源RNase(RNA酶),。
TRIzol是從細(xì)胞和組織中提取總RNA的即用型試劑,在樣品裂解或勻漿過程中,,TRIzol能保持RNA完整性,。加入氯仿后,溶液分為水相和有機(jī)相,,RNA在水相中,。取出水相,用異丙醇可沉淀回收RNA,。
※0.1%的8-羥基喹啉可以抑制RNase,,與氯仿聯(lián)合使用可增強(qiáng)抑制作用。
※異硫氰酸胍屬于解偶劑,,是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑,,可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)消失,導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解,,核蛋白迅速與核酸分離,。
※β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質(zhì)中的二硫鍵。
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