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DEAE纖維素 DE-52 層析填料樹脂

DEAE-纖維素,，它采用平均粒徑為50µm的顆粒型親水高分子聚合物,，表面又用大分子糖鏈接枝，使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性,，保持更高載量,，同時(shí)又具有更好的分辨率。由于比表面積大,，平衡和洗脫的時(shí)間也更短,。它經(jīng)過(guò)接枝即使是純化病毒，質(zhì)粒等超大分子的物質(zhì),，載量基本保持不變,。

填料特征：

注意事項(xiàng)：

1、 色譜柱裝填

（1）所需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣,，液體做脫氣處理,。填料可直接稱量需要的量用緩沖液溶漲一小時(shí)裝柱即可，如果不好溶脹,，可適當(dāng)加熱,。

（2）在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空氣,，關(guān)閉柱子出口，在柱內(nèi)保留少量的20%乙醇,。20%乙醇容易產(chǎn)生氣泡,，可以在里面加1%吐溫避免氣泡產(chǎn)生。也可以換成純水裝柱子,，但是需要把填料中的20%乙醇也換成純水,，具體的方法取需要體積的填料在抽濾漏斗上進(jìn)行,，也可以小心傾去填料上的20%乙醇，再換成5倍體積的純水,，反復(fù)沉淀去上清,，5次左右就可以用于裝柱子。

（3）此填料顆粒比較細(xì),，所以一定要注意柱子要選擇合適的篩網(wǎng),，不能漏，也可以取點(diǎn)填料加到篩網(wǎng)上試試,，如果沒(méi)有問(wèn)題再將填料連續(xù)倒入柱子時(shí),，要用玻璃棒的緊靠柱子內(nèi)壁引流，以減少氣泡的產(chǎn)生,，讓填料先自然沉降到填料體積不再變化,，而填料和上面的液體很好分層，上層溶液*澄清,，就可以開泵用適當(dāng)?shù)牧魉賶褐?，填料體積不再變化后，再把轉(zhuǎn)換頭緊頂在填料上就可以平衡柱子使用,。使用的流速要小于裝柱子的流速,。

（4）在裝柱子前，填料從冰箱中取出少要室溫放置2-3個(gè)小時(shí),，這樣避免裝柱子時(shí)由于溫度變化而使柱子中產(chǎn)生氣泡,。

2、 蛋白的結(jié)合

樣品的鹽濃度和pH要盡量和平衡柱子的緩沖液一致,，鹽濃度過(guò)高或者pH帶低也許掛不上,，所以要根據(jù)自己的樣品做適當(dāng)調(diào)整。

3,、 蛋白的洗脫

這個(gè)填料如果采用線性梯度洗脫,，柱子的直徑和高度比是大于10，數(shù)值越大越有利于分離,，而且樣品別上太多,，可以按約10mg/ml上樣，如果采用階段洗脫的方法,，裝短粗柱子就可以,，上樣量也沒(méi)有限制。階段洗脫容易放大,，重復(fù)性好,，如果洗脫條件好*可以得到和線性梯度一樣或者更好。采用什么方法*根據(jù)自己需要。

4,、 再生清洗

（1）用完之后用0.1M 醋酸洗5個(gè)柱體積,，然后用2M NaCl洗5個(gè)床體積，再用水洗中性,，然后用20%乙醇保存,。

（2）有機(jī)溶劑和水混合很容易產(chǎn)生氣泡，為了避免這樣情況,，可以把配好的有機(jī)溶劑在室溫放置過(guò)夜,，再使用，這樣可以避免氣泡進(jìn)柱子而導(dǎo)致柱子不能正常使用,。

特別注意：
上樣之前,，樣品少用0.45微米膜過(guò)濾，盡量去除色素,，否則色素會(huì)被吸附到填料上,，影響填料的正常使用。
在使用過(guò)程中,，不能使用強(qiáng)酸強(qiáng)堿,，酸和堿的濃度應(yīng)低于0.15摩爾。

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Macrophage immunomodulatory activity of the cationic polymer modified PLGA nanoparticles encapsulating Alhagi honey polysaccharide》 作者:Adelijiang Wusiman,Jin He,Tianyu Zhu,Zhenguang Liu,Pengfei Gu,Yuanliang Hu,Jiaguo Liu,Deyun Wang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:
《Hypoglycemic activity and gut microbiota regulation of a novel polysaccharide from Grifola frondosa in type 2 diabetic mice》 作者:Yuqing Chen,，Dan Liu,，Dingyi Wang，Shanshan Lai,，Ruting Zhong,，Yuanyuan Liu，Chengfeng Yang,，Bin Liu 期刊:Food and Chemical Toxicology 影響因子:3.977 PMID:30826407

DEAE纖維素 DE-52 層析填料樹脂