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Solarbio-細菌基因組DNA提取試劑盒
本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和*的緩沖液系統(tǒng)，提取細菌基因組DNA,。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司*新型材料,，能夠高效專一吸附DNA. 可大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA段大,，純度高,，質量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,，包括酶切,、 PCR、文庫構建,、Southern雜交等實驗,。
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽,。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心,。
1、取細菌培養(yǎng)液1ml,，12000rpm離心1min.,，盡量吸除上清。
2,、向菌體中加入200ul溶液A,，振蕩或用移液器吹打使菌體充分懸浮（如果是革蘭氏陽性菌,，可在此步驟加入終濃度為20mg/ml的溶菌酶）,，向懸浮液中加入20ul的RNase A (10mg/ml)，充分顛倒混勻,，室溫放置15-30min,。
3、向管中加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml),，充分混勻,，55℃消化30-60min，消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,，直樣品消化*為止,，此時可見菌液呈清亮粘稠狀,。
4、向管中加入200ul溶液B,，充分顛倒混勻,，如出現(xiàn)白色沉淀，可于75℃放置15-30min,，沉淀即會消失,，不影響后續(xù)實驗。如果溶液未變清亮,，說明樣品消化不*,，可能會導致DNA的提取量以及純度降低，還可能堵塞吸附柱,。
5,、向管中加入200ul無水乙醇，充分混勻,，此時還可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入到吸附柱中,，靜置2min,。
6、12000rpm離心2min. 棄廢液,，將吸附柱放入收集管中,。
7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇),。12000rpm離心1min,，棄廢液，將吸
附柱放入收集管中,。
8,、向吸附柱中加入600ul漂洗液， 12000rpm離心l min,， 棄廢液,，將吸附柱放入收集管中。
9,、12000rpm離心2min,，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,，否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)實驗如酶切、PCR等,。
10,、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,，向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min,，12000rpm離心1min,。
11、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,，室溫放置2min ,，12000rpm離心2 min，即可得到高質量的細菌基因組DNA,。

Solarbio-細菌基因組DNA提取試劑盒
注意事項:
1,、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA段較小且提取量下降,。
2,、若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用,，不影響提取效果,。
3、如果實驗中的離心步驟出現(xiàn)柱子堵塞的情況,，可適當延長離心時間,。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,，體積過小會影響回收效率,；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調此范圍),， pH值低于7. 0會降低洗脫效率,。DNA產(chǎn)物應保存在-20℃，以防DNA降解,。
5,、 DNA濃度及純度檢測：得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關,?；厥盏玫降腄NA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA應在OD260處有顯著吸收峰,，OD260值為1.0相當于大約50μg/ml雙鏈DNA,、40μg/ml單鏈DNA。OD260/0D280比值應為1.7-1.9,，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,，而使用去離子水，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值,，但并不表示純度低,。

相關產(chǎn)品：
E1020 EB染色液
D1010 6×DNA Loading Buffer
T1060 50×TAE 緩沖液
T1050 5×TBE 緩沖液
M1060 D2000 DNA Ladder
M1400 1kb DNA Ladder
G8142 GoldView II型核酸染色劑(5000×)
D1100 質粒小量提取試劑盒

相關文獻：

《Apatite nanoparticles mediate intracellular delivery of trehalose and increase survival of cryopreserved cells》 作者:Bin Wang,Gaoli Liu,Vasudevan Balamurugan,Yulong Sui,Guannan Wang,Yisheng Song,Qing Chang 期刊:Cryobiology 影響因子:2.141 PMID:30458174
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu  期刊:Cell Death & Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587