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Solarbio-瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒

本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合的DNA硅基質(zhì)材料和*的緩沖液系統(tǒng),，從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA段,，同時除去蛋白質(zhì)、其他有機化合物,、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì),。可回收100bp-10kb大小的片段,，回收率大于80%（小于100bp和大于100kb的DNA段回收率為30-50%）,。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,，包括酶切,、PCR、測序,、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等試驗,。
注意事項：在使用本試劑盒前請閱讀此注意事項,。
1. 電泳前好更換成新的電泳緩沖液,，以免影響電泳和回收效果。
2. 如下一步實驗要求較高,，則應(yīng)盡量使用TAE電泳緩沖液,。
3. 切膠時，紫外照射時間應(yīng)盡量短,，以免對DNA造成損傷,。
4. 回收小于100bp和大于100kb的DNA段時，應(yīng)加大溶膠液的體積,，延長吸附和洗脫的時間,。
5. 回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少,、洗脫體積越小,，回收率越低。
6. 如非指明,，所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心,。
操作步驟: （使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽,。）
1,、瓊脂糖凝膠電泳后，將單一的目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分）,，放入干凈的離心管中,，稱取重量。
2,、向膠塊中加入3倍體積溶膠液（如果凝膠重為0.1g,，其體積可視為100ul,則加入300ul溶膠液），50-55℃水浴放置10min,，期間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管,，以確保膠塊充分溶解。
注意：溶膠時,，如果溶膠液變?yōu)榧t色（正常情況下為淡黃色）,，可向含有DNA的膠溶液中加入10-30ul 3M醋酸鈉（pH5.2）將膠溶液調(diào)為淡黃色，否則將會影響DNA與吸附柱的結(jié)合,，影響回收效率,。
3、將上一步所得溶液加入一個吸附柱中（吸附柱放入收集管中）,，12000rpm離心30-60秒,，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中,。
注意：膠塊*溶解后好將膠溶液溫度降室溫再上柱,，因為吸附柱在較高溫度時結(jié)合DNA的能力較弱,。
4、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),，12000rpm離心1min,，棄廢液，將吸
附柱放入收集管中,。
5,、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm離心1min,，棄廢液,，將吸附柱放入收集管中。
6,、12000rpm離心2min,，盡量除去漂洗液。將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,，防止漂洗液中的乙醇影響后續(xù)的實驗。
7,、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,，向吸附膜中央懸空滴加適量經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置2min,，12000rpm離心1min,。

Solarbio-瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒
注意：1)、為了增加回收效率,，可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中,，12000rpm再次離心1min。
2),、洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30ul,，體積過小影響回收效率。
3),、洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響,，若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5之間。
8,、DNA產(chǎn)物-20℃保存,。

相關(guān)產(chǎn)品：
E1020 EB染色液
M1070 D2000 plus DNA Ladder
D1010 6×DNA Loading Buffer
T1060 50×TAE 緩沖液
T1050 5×TBE 緩沖液
G8142 GoldView II型核酸染色劑(5000×)