Western Blot膜再生液說明書
貨號:SW3020
規(guī)格:100 ml / 500 ml
保存:室溫保存,,一年有效。
產(chǎn)品簡介:
使用膜再生液可以對同一張膜進(jìn)行多次Western Blot檢測,。在室溫條件下,,將用過的膜浸泡在膜再生液10-60分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體,。隨后,,可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪Western Blot實(shí)驗(yàn),。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白,,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費(fèi)性步驟,。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,,使可比性更強(qiáng)。 Western Blot膜再生液特點(diǎn)是:無毒無味無害,,室溫下使用,,室溫下保存;可對同一張膜進(jìn)行5次以上的Western Blot檢測,。適用:清除硝酸纖維素膜或PVDF膜上結(jié)合的抗體,,不影響抗原蛋白。
使用方法: 1. 將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中,,室溫洗脫10-20分鐘,,時間長短應(yīng)該參考注意事項(xiàng)進(jìn)行優(yōu)化,洗脫某些抗體需較長時間,,更有長達(dá)60分鐘之久,。 2. 取出膜,用洗滌液(如TBST等)漂洗兩次,。 3. 此時膜上抗體已除去,,可再加入另一種抗體進(jìn)行檢測。
注意事項(xiàng): 1. 膜再生液實(shí)質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,,實(shí)際操作中,,膜類型、抗體類型,、濃度及抗原特性都影響洗脫難易度,。 2. 用ECL顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,,可再次加入ECL顯色液顯影,,如膠片上顯示條帶,表明抗體未除凈,,須進(jìn)一步在再生液中浸泡,,膠片上無顯色。 3. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA封閉的膜更容易再生,。 4. 盡量避免讓膜干燥,。
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