退火緩沖液(5×)說明書
貨號:D2810
規(guī)格:1ml/5ml
保存:室溫儲存,有效期少12個月,。
產品說明:
DNA 退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos),,即DNA 寡核苷酸退火緩沖液,該退火緩沖液不僅可以
用于常規(guī)的DNA Oligo 的退火,,而且特別適合于較難退火的用于siRNA 質粒構建的DNA Oligo 的退火,。使用
DNA 退火緩沖液(5×)可以有效避免DNA Oligo 自身形成發(fā)夾結構,并且兩條Oligo 退火后可以直接和經酶
切純化的質粒連接,。通常轉化后可以得到大量的陽性克隆,。
使用本試劑操作非常簡單,只需把待退火的DNA Oligo 和DNA 退火緩沖液(5×)按照一定比例混合后,,
置于PCR 儀上,,約60 分鐘即可完成。
操作步驟:
1. 用去離子水將DNA 退火緩沖液(5×)稀釋成1×工作濃度,。
2. 用DNA 退火緩沖液(1×)分別溶解互補的兩條DNA 寡核苷酸單鏈,,使它們的摩爾濃度相等,;
3. 取相同體積的步驟2 中得到的寡核苷酸單鏈溶液混合,置于PCR 反應管中,,樣品不要用礦物油覆蓋,。
4. 將PCR 反應管置于PCR 儀中,設置反應條件: 95℃變性2min,;緩慢降溫25℃,,降溫過程用時少
45min;產物可4℃短暫保存,,用于后續(xù)實驗,。長期保存可于-20℃凍存。
注意事項:
1. DNA 退火緩沖液(5X) 只適合于DNA oligo 的退火,,不能用于RNA oligo 的退火,。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
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