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透析袋的處理
分子在半透膜間的分離是由膜兩側(cè)溶液的濃度差驅(qū)動(dòng)的，受相對(duì)于膜內(nèi)微孔尺寸的分子大小
(分子質(zhì)量)的限制,。 微孔尺寸決定著截留分子質(zhì)量,，截留分子質(zhì)量的定義是當(dāng)90%的溶質(zhì)分子可
被膜截留時(shí)的分子質(zhì)量。 實(shí)際某一溶質(zhì)的通透性不僅取決于分子的大小,，還取決于分子的形狀,、
分子的水化程度及其所帶的電荷。 這些參數(shù)均受溶劑的性質(zhì),、pH以及離子強(qiáng)度的影響,。 因此截留
分子質(zhì)量只能作為參考，而不能地用來(lái)預(yù)測(cè)在各種溶質(zhì)和溶劑下的透析行為,。 透析膜孔徑范
圍很大(從100Da到2000kDa). 在透析大多數(shù)質(zhì)粒DNA和許多蛋白質(zhì)時(shí),，截留分子質(zhì)量在12000
'"'-14000Da之間比較適合。
(1)將透析管剪成適當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度(10"'20cm) 的小段,，即形成透析袋,。
(2)在大體積的2% (m/ V)碳酸氫納和lmmol/L EDTA(pH8. 0)中將透析袋煮沸10min。
(3)將透析袋用蒸館水*漂洗,。
(4)將透析袋置lmmol/L EDTA(pH8. 0)中煮沸10min.
(5)待透析袋冷卻,，存放于4
0
C，應(yīng)確保透析袋始終浸沒(méi)在液體中,。
重要:從此步起用透析袋時(shí)一定要戴手套操作,。
(6)在使用之前要用茶館水將透析袋里外加以清洗。
【;主】
也可將透析袋放在廣口瓶中充滿水,， 松動(dòng)瓶蓋,， 于20psiCl.40kg/cm2)高壓滅菌10mi n，代替第4步
用lmmol/L EDTA(pH8. 0)中煮沸10mi日的操作。