LB培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ),，直接影響微生物的試驗結(jié)果，而pH值又是培養(yǎng)基的重要監(jiān)控項目,。這是因為微生物的生長不僅依賴豐富的營養(yǎng),，還需要一個適宜的pH環(huán)境，只有在適宜的pH環(huán)境下微生物才能正常生長繁殖或體現(xiàn)其生物特性,，因此培養(yǎng)基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗結(jié)果,。在培養(yǎng)基配制過程中，滅菌過程對培養(yǎng)基pH值影響尤為重要,。我們常?？梢园l(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基在滅菌前后pH值有差異,，一般滅菌后pH值都會有所下降,，這是為什么呢?本文我們將和大家簡單聊一下滅菌前后pH值變化的那些事。
一,、滅菌的時間和溫度：
在高壓濕熱滅菌時,，長時間的高溫會對培養(yǎng)基產(chǎn)生很多不利的影響，例如會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)分解,、營養(yǎng)成分改變以及pH值變化,，進而影響微生物生長。同時還可能引起培養(yǎng)基顏色變化,、透明度降低,、瓊脂凝膠強度變化等。培養(yǎng)基在滅菌過程中,，滅菌的溫度和時間,，高壓滅菌器升溫、降溫的速率，滅菌容器的容積和裝載方式等因素都對培養(yǎng)基的滅菌有著重要影響,。
二,、培養(yǎng)基的成分：
在培養(yǎng)基的配制過程中我們會發(fā)現(xiàn)，同樣的滅菌溫度和時間,，同樣的體積和裝量的不同培養(yǎng)基,，在滅菌后pH值變化不同，有的培養(yǎng)基pH值變化較多,，有的培養(yǎng)基pH值變化較少,。這是因為不同培養(yǎng)基的成分不盡相同，而不同的成分在滅菌過程中對培養(yǎng)基ph值有著不同的影響,。糖類和蛋白胨是培養(yǎng)基中最常見的兩種重要成分,，那么這兩種成分分別對培養(yǎng)基滅菌后pH值有著什么樣的影響呢?
糖類，例如葡萄糖,、乳糖等作為碳源被微生物所利用,。糖類在高溫條件下會產(chǎn)生有機酸使培養(yǎng)基pH值下降。一般情況下,，培養(yǎng)基含糖量越高，滅菌后pH值下降越多,。如果過度滅菌pH值變化會更加明顯,。同時，糖類在高溫滅菌時容易焦化,，使培養(yǎng)基顏色加深,。
蛋白胨一般作為培養(yǎng)基氮源，為微生物的生長提供營養(yǎng)物質(zhì),。蛋白胨在培養(yǎng)基滅菌時還能對培養(yǎng)基的pH值變化起到一定的緩沖作用,。一般含胨量高的培養(yǎng)基，滅菌前后pH值變化相對較小,。
另外,，若培養(yǎng)基成分中含有緩沖劑，如磷酸氫二鉀等,，也可以減少培養(yǎng)基滅菌前后pH值的變化,。
三、測量pH值時的溫度：
同一培養(yǎng)基在不同溫度下測得的pH值也會有一定差異,，一般培養(yǎng)基的pH值會隨著測量時溫度的升高而降低,。培養(yǎng)基滅菌之后未*冷卻時，測量的pH值一般會偏低,，這是由于溫度升高時溶液中的游離離子數(shù)增多,，測得的pH值較低;反之，當溫度降低時游離離子數(shù)減少,，測得的pH值較高,。通常我們在測定培養(yǎng)基pH值時,，溫度控制在25℃左右。
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