Mouse Flt-3L ELISA Kit
Mouse Flt-3L ELISA Kit即小鼠 Fms 樣酪an酸激酶 3 配體(Flt-3L)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,。
檢測原理
包被:將針對小鼠 Flt-3L 的特異性捕獲抗體預包被在酶標板的孔壁上,,形成固相抗體,。
抗原抗體結(jié)合:加入待檢測的小鼠樣本,樣本中的 Flt-3L 會與固相化的捕獲抗體特異性結(jié)合,。
形成夾心結(jié)構(gòu):再加入生wu素標記的檢測抗體,,它能夠與已結(jié)合在捕獲抗體上的 Flt-3L 特異性結(jié)合,,從而形成 “捕獲抗體 - Flt-3L - 生wu素化檢測抗體" 的夾心復合物。
酶結(jié)合:隨后加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素,,鏈霉親和素與生wu素具有高度親和力,,會特異性結(jié)合到生wu素化的檢測抗體上。
顯色與檢測:加入底物溶液,,如四甲基聯(lián)苯胺(TMB),,在 HRP 的催化作用下,,TMB 發(fā)生顯色反應,,顏色由無色變?yōu)樗{色,顏色的深淺與樣本中 Flt-3L 的濃度成正比,。最后加入終止液終止反應,,使用酶標儀在特定波長下測定吸光度值,通過與標準曲線對比,,計算出樣本中 Flt-3L 的含量,。
試劑盒組成
預包被板:一般為 96 孔或 48 孔聚苯乙烯板,表面已包被好捕獲抗體,,為 Flt-3L 的結(jié)合提供固相載體,。
標準品:一系列已知濃度的 Flt-3L 蛋白標準溶液,用于繪制標準曲線,,通常濃度范圍覆蓋了試劑盒的檢測范圍,。
檢測抗體:生wu素標記的特異性抗體,可與 Flt-3L 特異性結(jié)合,,用于檢測已與捕獲抗體結(jié)合的 Flt-3L,。
酶結(jié)合物:通常是 HRP 標記的鏈霉親和素,用于與生wu素化的檢測抗體結(jié)合,,催化底物顯色反應,。
底物溶液:常用 TMB 溶液,在 HRP 的作用下發(fā)生顯色反應,,產(chǎn)生可檢測的信號,。
終止液:如硫酸溶液,用于終止顯色反應,,使顏色穩(wěn)定以便于酶標儀讀數(shù),。
洗滌緩沖液:用于洗滌酶標板,去除未結(jié)合的物質(zhì),,減少非特異性信號,。
稀釋液:用于稀釋樣本、標準品和檢測抗體等,,使其達到合適的工作濃度,。
適用樣本類型
血清:采集小鼠血液后自然凝固,,離心后得到的上清液,可反映小鼠體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中 Flt-3L 的水平,。
血漿:使用抗凝劑采集小鼠血液,,離心后獲得的上清液。不同抗凝劑可能對檢測結(jié)果有影響,,需按試劑盒要求選擇,。
細胞培養(yǎng)上清:培養(yǎng)小鼠細胞后收集的培養(yǎng)液,可用于檢測細胞分泌到細胞外的 Flt-3L,。
組織勻漿:將小鼠組織經(jīng)過研磨等處理制成勻漿,,離心后的上清液,可用于檢測組織中 Flt-3L 的表達情況,。
性能指標
靈敏度:一般可達到較低的檢測限,,如某些試劑盒的靈敏度可達幾 pg/ml,能夠檢測到樣本中極低濃度的 Flt-3L,。
檢測范圍:通常有一個較寬的檢測區(qū)間,,例如 10 - 1000 pg/ml,以滿足不同樣本中 Flt-3L 含量的檢測需求,。
精密度:包括板內(nèi)精密度和板間精密度,,以變異系數(shù)(CV%)表示。優(yōu)質(zhì)的試劑盒板內(nèi) CV% 通常小于 10%,,板間 CV% 小于 15%,,保證實驗結(jié)果的重復性和穩(wěn)定性。
特異性:試劑盒中的抗體對小鼠 Flt-3L 具有高度特異性,,與其他類似蛋白或物質(zhì)的交叉反應極低,,確保檢測結(jié)果準確反映 Flt-3L 的含量。
應用領域
血液學研究:在研究小鼠造血系統(tǒng)疾病如白血病,、再生障礙性貧血等時,,通過檢測 Flt-3L 的水平,可了解造血微環(huán)境的變化以及造血干細胞的增殖分化狀態(tài),,為疾病的診斷和治療提供依據(jù),。
免疫學研究:在研究免疫細胞的發(fā)育和免疫反應的調(diào)節(jié)時,F(xiàn)lt-3L 與樹突狀細胞等免疫細胞的發(fā)育和功能密切相關,。使用該試劑盒檢測 Flt-3L 含量,,有助于深入了解免疫調(diào)節(jié)機制以及免疫相關疾病的發(fā)病機制。
腫瘤研究:在小鼠腫瘤模型中,,F(xiàn)lt-3L 的表達與腫瘤的生長,、轉(zhuǎn)移和免疫逃逸等過程有關。檢測腫瘤組織或血清中的 Flt-3L 水平,可為腫瘤的治療和預后評估提供參考,。