相信使用液相色譜儀的同學(xué)們,,每天都在跟甲醇和乙腈打交道,。但是你知道,為啥液相色譜儀流動相基本只用甲醇和乙腈嗎,?
當(dāng)然,,液相色譜流動相還有水、以及往水里面添加的一些酸,、堿或者緩沖鹽,。但是我們今天只討論有機(jī)相這個部分,,水相部分下次有機(jī)會再來聊。
要回答這個問題,,那就得要了解一下液相色譜對于溶劑的一般要求是什么,。讓我們一起,從一般的常識出發(fā),,來討論一下這個問題,。
01溶解度
首先,流動相必須對被分析的樣品有一定的溶解度,,對吧,?
這個問題非常直接。如果樣品在流動相中不溶解,,那即使你使用了其他溶劑將樣品溶解,,但只要樣品一進(jìn)入液相系統(tǒng),一接觸到流動相,,便會產(chǎn)生析出,,直接堵塞系統(tǒng),根本不可能進(jìn)行分析,。
絕大多數(shù)時(shí)候,,都建議采用流動相來溶解和稀釋樣品。如果用來稀釋樣品的溶劑跟流動相的洗脫強(qiáng)度差距比較大的時(shí)候,,就可能造成樣品出峰拖尾的現(xiàn)象,,我們把這個現(xiàn)象叫做液相色譜的“溶劑效應(yīng)"。
02腐蝕性
其次,,流動相溶劑不應(yīng)該對液相系統(tǒng)有腐蝕性,。
液相系統(tǒng)中與流動相接觸的管路大多數(shù)情況下都是不銹鋼的。這是一種高規(guī)格的316不銹鋼,,它具有很強(qiáng)的抗腐蝕性,。但是有些溶劑對于不銹鋼卻有很強(qiáng)的腐蝕性,比如氯仿,,以及可能含有過氧化物色譜級醚等等,。
有些時(shí)候,我們也喜歡使用PEEK管路和接頭,,因?yàn)樗鼈儼惭b拆卸起來比較方便,。雖然PEEK材質(zhì)也有很好的化學(xué)惰性,但是長期在二甲基亞砜,、二氯甲烷及四氫呋喃等溶劑環(huán)境下,,也會出現(xiàn)變脆和破裂。
03紫外吸收
另外,,液相流動相溶劑對于紫外線是應(yīng)該是透明的,。
因?yàn)橐合嗌V中的大多數(shù)檢測都使用紫外檢測器來檢測的,,這樣就不會對我們要檢測的樣品產(chǎn)生干擾。
但是對于低于 220nm 的低紫外波長的檢測,,這可能是個問題,,因?yàn)槟愫茈y找到*透明的溶劑。
如果在你選取的檢測波長下,,使用的流動相溶劑有著一定的紫外吸收,,也就是說它不是*透明的,那么,,你的檢測特異性就不那么強(qiáng)了,,樣品定量結(jié)果的線性也會受影響。
當(dāng)然,,如果你使用的是梯度洗脫條件,,那么最直接的現(xiàn)象就是檢測基線的漂移了。
從這個角度來看,,乙腈是更加優(yōu)于甲醇的,,因?yàn)橐译娴淖贤饨刂共ㄩL是190nm,而甲醇是210nm,。在低波長的檢測中,乙腈可以提供更加平整的基線和更好的定量結(jié)果,。