分光光度法測試微量元素

一、錫----苯芴酮比色法

試樣經(jīng)消化后,，在弱酸性溶液中四價錫離子與苯芴酮形成微溶性橙紅色絡(luò)合物,，在保護(hù)性膠體存在下與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

1,、酒石酸溶液(100 g/L)

2,、抗壞血酸溶液(10 g/L):臨用時配制。

3,、動物膠溶液(5 g/L):臨用時配制,。

4、酚酞指示液(10 g/L):用乙醇溶解,。

5,、氨水(1+1)

6、硫酸(1+9)    

7,、苯芴酮溶液(0.1g/L):稱取0.020 g苯芴酮（1,3,7一三羥基一9一苯基蒽醌),，加少量甲醇及硫酸（1+9）數(shù)滴溶解，以甲醇稀釋至200 mL,。

8,、錫標(biāo)準(zhǔn)使用液（10.0ppm）：

吸取 1.00mL-5.00mL試樣消化液和同量的試劑空白溶液，分別置于25mL比色管中,。

吸取 0, 0.20,0.40,0.60,0.80,1.00 mL錫標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0ug錫),，分別置于25mL比色管中。

于試樣,、消化液,、試劑空白液及錫標(biāo)準(zhǔn)液中各加0.5 mL酒石酸溶液(100g/L)及1滴酚酞指示液，混勻,，各加氨水(1+1)中和至淡紅色,，加3 mL硫酸(1+9),1mL動物膠溶液及2.5 mL抗壞血酸溶液，再加水至25mL_,，混勻,，再各加2 mL苯芴酮溶液，混勻，1小時后測量,，用2 cm比色杯以水調(diào)節(jié)零點(diǎn),，用可見分光光度計于波長490 nm處測吸光度，標(biāo)準(zhǔn)各點(diǎn)減去零管吸光值后,，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計算直線回歸方程,，試樣吸光值與曲線比較或代人方程求出含量。

二,、磷

食物中的有機(jī)物經(jīng)酸氧化,，使磷在酸性條件下與鉬酸銨結(jié)合生成磷鉬酸銨。此化合物被對苯二酚,、亞硫酸鈉還原成藍(lán)色化合物——鑰藍(lán),。用可見分光光度計在波長660 nm處測定鑰藍(lán)的吸收光值。

1,、15%硫酸溶液:  

2,、鑰酸銨溶液:1g/200ml,用15%硫酸溶液稀釋。

3,、亞硫酸鈉溶液:20g/100ml,臨時配制,，否則可使鑰藍(lán)溶液發(fā)生混濁.

4、磷標(biāo)準(zhǔn)使用液（10.0ppm）：

吸取0.625,，1.25,，2.5，3.75,，5,，6.25 ml磷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于含磷量0，5,10,20,30,40,50ug)分別置于25mL具塞試管中,。

準(zhǔn)確吸取試樣測定液2.5mL及同量的空白溶液,，分別置于25ml具塞試管中。

依次加人2.5mL鉬酸溶液搖勻,，靜置幾秒鐘,。加人1.25 ml亞硫酸鈉溶液，1.25 mL對苯二酚溶液,，搖勻,。加水至刻度，混勻,。靜置30分鐘以后,，在分光光度計660 nm波長處測定吸光度。以測出的吸光度對磷含量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

三,、鎳

試樣中的鎳用稀酸提取后,，在強(qiáng)堿性溶液中以過硫酸銨為氧化劑，鎳與丁二酮杇形成紅褐色絡(luò)合物,，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量,。

國標(biāo)是非消化處理的,，是不是稱多點(diǎn)就可以了,，但又考慮消化時間可能太長,。

1,、丁二酮圬(C4H3N202,)一乙醇溶液(10g/L):    

2、酒石酸鉀鈉溶液(500 g/L)：

3,、氫氧化鈉溶液(100g/L):              

4,、過硫酸銨溶液(60g/L):臨用現(xiàn)配,

5,、鎳標(biāo)準(zhǔn)使用液（1.0ug)：

吸取 0,1,，2,，4，6,，8，10,，12,，14，16ml鎳標(biāo)準(zhǔn)使用液,，分別置于25mL具塞比色管中,。

吸試樣多少？

于試樣及標(biāo)準(zhǔn)管中分別依次加人1.25mL酒石酸鉀鈉溶液,3.75mL氫氧化鈉溶液,1.25mL過硫酸銨溶液,，混勻,，放置3 min。再各加人0.5 mL丁二酮圬一乙醇溶液,，加水至25mL,混勻,。放置15 min后，用3cm比色杯,，以水調(diào)節(jié)零點(diǎn),，于可見分光光度計波長470 nm處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,。

四,、微波消解——分光光度法測定大豆中的硼量

分別吸取0、0.5,、1.5,、2.5、3.5,、5 ,、6 ,、7.5mL 硼標(biāo)準(zhǔn)使用液, 于25mL 比色管中；

加5mL 乙酸銨緩沖溶液, 加2.5 mL 甲亞胺溶液, 混勻, 加水至刻度, 搖勻,。放置1 h , 于可見分光光度計420 nm 處,測量吸光度,。

試樣用(1+1)HN3·H2O 溶液調(diào)節(jié)pH 至6.5 左右。

1,、硼標(biāo)準(zhǔn)使用液(5.0ppm):               

2,、氨水1+1：

3、乙酸銨緩沖溶液(pH 6.7): 取115 g 乙酸銨, 稀釋到500mL , 再加入33.5g EDTA , 混勻.

4,、甲亞胺溶液(9.0 g/L): 現(xiàn)配.稱取1.8g 甲亞胺和4 g抗壞血酸, 于200mL 水中, 微熱溶解,。

五、水質(zhì)硼的測定——甲亞胺-H 酸光度法

本方法的檢出濃度為 0.03ppm,， 測定上限為5.0ppm(相當(dāng)于10.0ppm的 HBO2) 可用于飲用水,，地面水中硼的測定。錫,、碲,、汞與顯色試劑生成白色沉淀，鋁鈹鈦鋯釩鎵鉬(VI)生成黃色,，銅,、鉻生成棕黃色，鐵(III) 鐵(II)均對測定有干擾,，可用EDTA加以掩蔽,，鉀鈉的存在會減緩反應(yīng)的速度但可延長反應(yīng)時間，在6h 后再進(jìn)行測定而消除干擾,。

原理

在pH5.2 的鹽酸和乙酸銨緩沖溶液中,，硼與甲亞胺-H 酸生成可溶于水的甲亞胺H-硼酸棕黃色化合物，其zui大吸收波長在410~420nm 處,，由于顯色速度慢,，6h后發(fā)色*，該化合物在30h內(nèi)穩(wěn)定,。

試劑：

1,、乙酸銨水溶液500g/L ： 

2、1+4 鹽酸溶液:40ml稀釋至200ml  

3,、EDTA 飽和溶液: 常溫下溶解度是0.2g/L, EDTA二鈉鹽的溶解度較大,，在22℃時，每100毫升水中可镕解11.1克,，此溶液的濃度約為0.3moL/L-1,。由于EDTA二鈉鹽水溶液中主要是H2Y2-，所以溶液的pH值接近于4.42,。其溶解度比較小受溫度影響比較大長時間存放可認(rèn)為其溶解度不變,， 一般來說是用其鈉鹽酸化后制得飽和溶液,。

4、硼標(biāo)準(zhǔn)使用液（10ppm）：

5,、甲亞胺-H 酸顯色劑：準(zhǔn)確稱取0.50g 甲亞胺-H 酸和2g 抗壞血酸溶于100mL 去離子水中,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

測定：

準(zhǔn)確移取HBO2標(biāo)準(zhǔn)使用液0 ,、0.1,、0.3、0.625,、1.25,、2.5、7.5,、15ml分別移入25ml比色管,；

分別加入0.50mL EDTA 飽和溶液，2.5mL鹽酸溶液(1+4) ,，5.0mL 乙酸銨溶液,，搖勻后準(zhǔn)確加入6.00mL 甲亞胺-H 酸顯色劑，搖勻并用去離水稀釋至標(biāo)線,，搖勻,。

測量靜置暗處6h后，用10mm 比色皿于可見分光光度計于420mm 波長處以空白試驗(yàn)溶液作參比測定吸光度

注意事項

(1) pH 對顯色反應(yīng)有影響適宜的pH 范圍在5.2~5.8

(2) 顯色劑甲亞胺-H 酸易氧化故應(yīng)保存在有塑料壓蓋的棕色瓶中試劑現(xiàn)用現(xiàn)配同時加入抗壞血酸防止氧化

(3) 當(dāng)HB02 濃度在6.0mg/L 時,，在50mL試液中加入6.0mL 的顯色劑是*的絡(luò)合比。

(4) 硬質(zhì)玻璃中常含有硼 試樣的預(yù)處理和顯色操作不能用玻璃器皿所使用的玻璃器皿不應(yīng)與試樣溶液作長時間接觸,，用其他玻璃器皿時應(yīng)先進(jìn)行全程序空白試驗(yàn)用扣除空白的方法以消除玻璃器皿的影響

(5) 配制試劑用的水均需用石英蒸餾器重蒸餾過的水或用去離子水,。

六、分光光度法測定白花蛇舌草中的鈦含量

準(zhǔn)確移取10ppm 的鈦標(biāo)準(zhǔn)使用液0, 1, 2,，3, 4, 5 mL 分別置于25 mL 容量瓶中,

各加1∶1 鹽酸10mL,、10% 抗壞血酸0.5 mL , 搖勻, 各加2% 二安替比林甲烷5mL , 用水稀釋至刻度, 搖勻靜置30 min 。波長為383 nm.

樣品加10% 抗壞血酸至*褪色,。加2% 二安替比林甲烷5mL , 用水稀至刻度, 搖勻,。

1、鈦標(biāo)準(zhǔn)使用液（10ppm）,；      

2,、鹽酸溶液1 mol/L：

3、二安替比林甲烷溶液2%: 準(zhǔn)確稱取10.0g 二安替比林甲烷粉末, 用1 mol/L 的鹽酸溶液溶解并定容至500 mL,。

七,、水中微量硅的硅鉬藍(lán)光度法測定

硅鉬藍(lán)光度法測定硅, 一般在較高酸度下正硅酸與鉬酸銨形成β型黃色硅鉬雜多酸, 用還原劑還原成藍(lán)色硅鉬藍(lán), 在可見分光光度計于波長810～820nm 進(jìn)行光度法測定。

目前, 已知的還原劑種類很多, 且各有優(yōu)缺點(diǎn), 如氯化亞錫,、硫酸亞鐵銨, 還原速度快,、靈敏度高, 而穩(wěn)定性差; 抗壞血酸, 硅鉬藍(lán)很穩(wěn)定, 而還原速度太慢;硫酸亞鐵和草酸混合作還原劑, 混合液穩(wěn)定時間短; 胺基萘酚磺酸, 硅鉬藍(lán)穩(wěn)定時間雖長, 但易產(chǎn)生沉淀而還原能力降低; 米吐爾-Na 2SO3 作還原劑易產(chǎn)生沉淀, 還原速度較慢且不穩(wěn)定,。本文研究和配制了甲醛合次硫酸氫鈉和亞硫酸鈉混合液, 作為水中微量硅的(硅鉬藍(lán)) 光度法測定的還原劑, 實(shí)驗(yàn)證明其穩(wěn)定性、還原能力,、靈敏度,、準(zhǔn)確度均較好, 還原劑可保存時間較長。

標(biāo)準(zhǔn)硅使用液（20ppm）:

鉬酸銨溶液: 稱取7.2 g 鉬酸銨于50mL 燒杯中, 加10mL 蒸餾水加熱溶解, 趁熱慢慢把它加入5mL濃硫酸和11mL 濃硝酸中, 攪拌均勻, 稍冷后用水稀釋至30mL, 如有渾濁, 放置后過濾.

酒石酸溶液:21g/30ml

甲醛合次硫酸氫鈉(還原劑) 溶液: 稱取1.50 g 甲醛合次硫酸氫鈉和4.0 g 亞硫酸鈉于燒杯中, 加蒸餾水溶解至30mL, 貯于棕色帶滴管小瓶中,。

測定：

準(zhǔn)確吸取硅標(biāo)準(zhǔn)使用液0,，0.2，0.5,，0.7,，0.9，1.2,，1.5 mL 于25mL 比色管中,加入0.2ml鉬酸銨, 搖勻, 放置4～5min,然后加入0.15ml酒石酸, 搖勻, 放置2min, 再加入0.4ml還原劑, 用蒸餾水稀至刻度, 搖勻, 置于沸水浴中加熱3～5min, 取出流水冷卻至室溫, 在可見分光光度計于波長810～820nm 和1mL 比色皿中, 用試劑(或蒸餾水) 作參比,測其吸光度A值,。

八、光度法同時側(cè)定磷和硅的研究

磷和硅與鉬酸銨都能生成黃色配合物, 此配合物與還原劑如能同時被還原為鉬藍(lán), 但草酸能迅速破壞磷鉬黃, 且實(shí)驗(yàn)表明, 在0～2ppm范圍內(nèi), 磷鉬藍(lán)和硅鉬藍(lán)的吸光度加合性良好,。故在一定條件下, 先測出磷,、硅都存在時的吸光度, 再在相同條件下, 加入草酸,測出硅鉬藍(lán)的吸光度, 二者之差即為磷鉬藍(lán)的吸光度, 然后分別在其相應(yīng)的工作曲線上查出對應(yīng)的磷和硅的含量。

鉬酸銨溶液(2.5﹪)：

NaF(0.24﹪)-SnCL2(0.2﹪):2.4g NaF/100ml水,，再加0.2g SnCL2,當(dāng)天使用,。

草酸溶液（1﹪）：

硫酸（1mol/L）：

磷標(biāo)準(zhǔn)使用液（10ppm）

硅標(biāo)準(zhǔn)使用液（10ppm）

吸0，1.0,，2.0,，3.0，4.0,，5.0ml的標(biāo)準(zhǔn)使用液于25ml比色管中,，加入1.2ml硫酸（1mol/L）,2.5ml的鉬酸銨溶液, 沸水浴加熱30秒, 10ml NaF(0.24﹪)-SnCL2(0.2﹪),冷卻后稀釋至刻度，搖勻,。用1cm比色皿,可見分光光度計于690nm處, 以試劑空白為參比測量吸光度.

九,、鋁

試樣經(jīng)處理后，三價鋁離子在乙酸一乙酸鈉緩沖介質(zhì)中,，與鉻天青S及溴化十六烷基*胺反應(yīng)形成藍(lán)色三元絡(luò)合物,，于640nm波長處測定吸光度并與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。

1,、1%(體積分?jǐn)?shù))硫酸:0.1ml稀釋至10ml.

2,、乙酸一乙酸鈉溶液:稱40.8g乙酸鈉溶于540mL水中，加3.12ml冰乙酸,，調(diào)pH至5.5,，用水稀釋至600mL,

3、鉻天青S溶液(0.5 g/L):

4,、溴化十六烷基*胺溶液(0.2 g/L):0.04g/200ml ,必要時加熱助溶,。

5,、抗壞血酸溶液（10g/L）:臨用時配。

6,、鋁標(biāo)準(zhǔn)使用液（1.0ppm）：

應(yīng)保證試樣溶液中含1﹪硫酸.

吸取 0,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,6.0m L鋁標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于含0, 0.5, 1.0,2.0,4.0,6.0ug)分別置于25mL比色管中,，依次向各管中加人1mL 1%硫酸溶液。

吸取1.0 mL消化好的試樣液,，置于25mL比色管中,。

向標(biāo)準(zhǔn)管、試樣管,、試劑空白管中依次加人8.0 ml乙酸一乙酸鈉緩沖液,1.0 ml抗壞血酸溶液,，混勻，加2.0 mL溴化十六烷基*胺溶液,，混勻,，再加2.0mL鉻天青S溶液，搖勻后,，用水稀釋至刻度,。室溫放置20min后，用1cm比色杯,，于分光光度計上,，以零管調(diào)零點(diǎn)，紫外可見分光光度計于640 nm波長處測其吸光度,，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量,。

十、鋅 ----雙硫腙比色法(一次提取)

樣品經(jīng)消化后,在pH4.0～5.5時,鋅離子與雙硫腙形成紫紅色絡(luò)合物,溶于,，加入硫代硫酸鈉,，防止銅、汞,、鉛、鉍,、銀和鎘等離子干擾,，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

試劑：

1.乙酸鈉溶液(2 mol/I):稱取68 g乙酸鈉(CH,COONa·3H,O),，加水溶解后稀釋至250 mL,

2.乙酸(2mol/L):量取10.0 mL冰乙酸,，加水稀釋至85mL,

3.乙酸一乙酸鹽緩沖液:乙酸鈉溶液(2 mol/L)與乙酸(2 mol/L)等量混合，此溶液pH為4. 7左右,。用二硫腺一溶液(0. 1 g/L)提取數(shù)次,，每次10 mL,除去其中的鋅，至層綠色不變?yōu)橹?，棄層,，再用提取乙酸一乙酸鹽緩沖液中過剩的二硫蹤,，至無色，棄去,。

4.硫代硫酸鈉溶液(250 g/L):乙酸鈉溶液(2 mol/L)與乙酸(2 mol/L)等量混合,，此溶液pH為4. 7左右。用二硫腺一溶液(0. 1 g/L)提取數(shù)次,，每次10 mL,除去其中的鋅,，至層綠色不變?yōu)橹梗瑮壢?，再用提取乙酸一乙酸鹽緩沖液中過剩的二硫蹤,，至無色，棄去,。

5. 1:1氨水

6.甲基橙指示液(2 g/L):稱取0.2 g甲基橙,，用乙醇(20%)溶解并稀釋至100 Ml

7.鹽酸(2 mol/L):量取10 mL鹽酸，加水稀釋至60 mL,

8.鋅標(biāo)準(zhǔn)使用液（1.0ug）:

10. 二硫蹤一溶液(0.01g/L),。

吸取5.0～10.0mL定容的消化液和相同量的試劑空白液, 分別置于25mL比色管中,；

吸取0.0、1.0,、2.0,、3.0、4.0,、5.0mL鋅標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0,、1、2,、3,、4、5μg鋅),分別置于25mL比色管中,。

于樣品消化液,、試劑空白液及鋅標(biāo)準(zhǔn)液中各加1滴甲基橙指示液，用氨水調(diào)至由紅變藍(lán),，再各加5mL乙酸-乙酸鹽緩沖液及1mL硫代硫酸鈉溶液混勻后, 各加10.0mL0雙硫腙-溶液,，定容至25ml.劇烈振搖4min，靜置分層,，經(jīng)脫脂棉將層濾入1cm比色杯中,以調(diào)節(jié)零點(diǎn),于可見分光光度計波長530nm處測吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,。

十一、鋅試劑- 環(huán)己酮分光光度法測定乳制品奶粉中的鋅

吸取0,、0.5,、1.0、3.0、5.0,、7.0,、10.0、15.0ml鋅標(biāo)準(zhǔn)液,；

各加入2滴酚紅指示劑用氫氧化鈉(40 g/L)溶液調(diào)至紅色,再用鹽酸( 1+50)調(diào)至黃色,加入0.5克抗壞血酸, 5.0ml緩沖液, 2.0 ml溶液(10 g/L)和3.0 ml鋅試劑溶液再加入1.5 ml環(huán)己酮,。混勻,放置15min用1 cm 比色皿,以試劑空白為參比于可見分光光度計620 nm波長測定吸光度,。

1,、酚紅的乙醇溶液(1 g/L)：

2、氫氧化鈉(40 g/L)：      

3,、鹽酸(1+50)：         

4,、抗壞血酸

5、緩沖液：稱取42 g粒狀氫氧化鈉,溶于水, 加入155 g 硼酸, 溶解后再加純水至500 ml;所用試劑均為分析純,實(shí)驗(yàn)用水為純水,。

6,、溶液(10 g/L)：          

7、鋅標(biāo)準(zhǔn)使用液（10.0ppm）：

8,、鋅試劑溶液：紫棕色結(jié)晶性粉末,。溶于乙醇和堿，溶于氫氧化鈉呈紅色,，不溶于水,。遇鋅生成藍(lán)色化合物，稀時為溶液,，濃時為深藍(lán)色沉淀,。

十二、微波消解- 紫外分光光度法測定水中總氮

取一定量水樣于聚四氟乙烯密封消解罐中, 加水至25 mL, 搖勻,。

分別取0.,、0.1、0.3,、0.5,、0.7、1.0,、3.0,、5.0、7.0,、9.0、11.0,、12.0,、13.0、15.0 mL氮標(biāo)準(zhǔn)使用液于聚四氟乙烯密封消解罐中, 加水至25 mL, 搖勻。

依次加入0.50 mL H2O2 , 0.50mL 9 mol/L硫酸溶液, 加蓋密封后于微波消解爐中10檔加熱8 min, 冷卻至室溫,。注入10 mm石英比色皿中, 分別在紫外可見分光光度計的220和275 nm處測定其吸光度, 用雙波長紫外分光光度法進(jìn)行總氮測定,。氮含量在0.024 2～9.60ppm之間時與吸光度成線性關(guān)系,以去離子水代替試樣做空白試驗(yàn)。

過氧化氫是用于消解水中的有機(jī)物質(zhì)包括含氮有機(jī)物的, 因此其用量是一個重要的控制因素,。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn), 在過氧化氫用量為0.40～0.80 mL之間吸光度基本保持不變,

酸性條件下, 過氧化氫具有較強(qiáng)的氧化性; 但酸性過強(qiáng), 又不利于NH4+ 轉(zhuǎn)化為NO3- ,。

1、氮標(biāo)準(zhǔn)使用液: 20 mg/L硝酸鉀標(biāo)樣;

2,、硫酸溶液（9 mol/L;）

3,、過氧化氫溶液（0.3 g/mL）;         

4、本實(shí)驗(yàn)用水均為無氨水

十三,、氟——灰化蒸餾— 氟試劑比色法

試樣經(jīng)硝酸鎂固定氟,，經(jīng)高溫灰化后，在酸性條件下,，蒸餾分離氟,，蒸出的氟被氫氧化鈉溶液吸收，氟與氟試劑,、硝酸鑭作用,，生成藍(lán)色三元絡(luò)合物，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量,。

本方法所用水均為不含氟的去離子水,，試劑為分析純，全部試劑貯于聚乙烯塑料瓶中,。

1 丙酮:需500ml.

2 鹽酸(1+11):取10mL鹽酸,，加水稀釋至120mL.

3 乙酸鈉溶液(250g/L)：       

4 乙酸溶液(1mol/L):取3ml,稀釋至50mL.

5.氫氧化鈉溶液(40g/L)：

6 茜素氨羧合劑溶液: 現(xiàn)配。稱取0.19 g茜素氨羧絡(luò)合劑,，加少量水及氫氧化鈉溶液(40 g/L)使其溶解,，加0.125g 乙酸鈉，用乙酸溶液調(diào)節(jié)pH為5.0(紅色),，加水稀釋至500ml,。

7 硝酸鎂溶液(100 g/L):

8 硝酸鑭溶液: 現(xiàn)配。稱取0.11 g硝酸斕,，用少量乙酸溶液溶解,，加水至約225 ml，用乙酸鈉溶液(250 g/L)調(diào)節(jié)pH為5.0,，再加水稀釋至250mL,。

9 緩沖液(pH4. 7):稱取30 g無水乙酸鈉，溶于400 mL水中,，加22 mL冰乙酸,，再緩緩加冰乙酸調(diào)節(jié)pH為4. 7,，然后加水稀釋至500mL.

10 氫氧化鈉溶液(100 g/L):

11 酚酞一乙醇指示液(10 g/L):

12 硫酸(2+1):

13、氟標(biāo)準(zhǔn)使用液（5.0ppm）：

稱取混勻試樣5.00g (以鮮重計),，于30m1坩堝內(nèi),，加5.0 m L硝酸鎂溶液和0.5m L氫氧化鈉溶液(100 g/L)、使呈堿性,，混勻后浸泡0.5 h,，置水浴上蒸干，再低溫炭化,，至*不冒煙為止,，移人馬弗爐中，600度灰化6h,，取出,，放冷。

于坩堝中加10m L水,，將數(shù)滴硫酸(2十1)慢慢加人坩堝中,，防止溶液飛濺，中和至不產(chǎn)生氣泡為止,。將此液移人500mL蒸餾瓶中,，用20mL水分?jǐn)?shù)次洗滌坩堝，并入蒸餾瓶中,。

于蒸餾瓶中加60mL硫酸(2+1),，數(shù)粒無氟小玻珠，連接蒸餾裝置,，加熱蒸餾,。餾出液用事先盛有5 mL水、7滴~20滴氫氧化鈉溶液(100 g/L)和1滴酚酞指示液的50mL燒杯吸收,，當(dāng)蒸餾瓶內(nèi)溶液溫度上升至190℃時停止蒸餾(整個蒸餾時間約15 min-20 min),

取下冷凝管,，用滴管加水洗滌冷凝管3次~4次，洗液合并于燒杯中,。再將燒杯中的吸收液移人50 mL容量瓶中,，并用少量水洗滌燒杯2次~3次，合并于容量瓶中,。用鹽酸(1+11)中和至紅色剛好消失,。用水稀釋至刻度，混勻,。

吸取0,1.0,3.0,5.0,7.0,9.0 mL氟標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0,1,3,，5,7，9ug氟) 于25 mL帶塞比色管中,。

分別吸取試樣蒸餾液各10.0 mL于25 mL帶塞比色管中,。

各加2.OmL茜素氨羧絡(luò)合劑溶液,、3.0 mL緩沖液、6.0 mL丙酮,、2.0 m L硝酸鑭溶液，再加水至刻度,，混勻,，放置20m in，以3cm比色杯(參考波長580nm)用零管調(diào)節(jié)零點(diǎn),，測各管吸光度,，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較。