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光度噪聲是影響紫外可見分光光度計(jì)的重要指標(biāo)
光度噪聲是影響紫外可見分光光度計(jì)的重要指標(biāo)
一,、光度噪聲對(duì)分析測試誤差的影響
在光度分析中, 特別在紫外可見光度分析中, 光度噪聲( Photomet ricNoise ) 是影響比耳定律偏離的zui主要因素之一, 是主要分析誤差的來源。若已知光度噪聲為N, 則可根據(jù)A. J. Owen 提出的計(jì)算公式: 噪聲誤差(%) =N×100/ A, 計(jì)算出不同N 的情況下, 吸光度的相對(duì)誤差ΔA/ A (ΔA 為吸光度誤差, A 為吸光度真值) 與A 的關(guān)系,?;蚯蟪霾煌珹 的情況下, ΔA/ A與N 的關(guān)系,。
目前國內(nèi)外有些儀器制造者和使用者們, 不注重儀器的光度噪聲對(duì)分析測試結(jié)果的影響,。有的廠商甚至在樣本上不給出光度噪聲這個(gè)重要指標(biāo),。有些廠商( 技術(shù)人員) 在測試光度噪聲時(shí), 只測15min 或30min , 這些都是不對(duì)的,是值得注意的重要問題。
紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲是分析誤差的主要來源之一, 它主要影響或限制是被測試樣濃度的下限,。目前, 上zui的紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲為±0. 0002Abs ( 峰-峰值, 如美國Va rian 公司的Ca ry5 ),。它的測量下限在0. 02Abs 時(shí), 測量誤差可達(dá)到1%。國外還有許多紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲都在±0. 0002Ab s ( 峰-峰值, 如美國P-E 公司的Lambda900 等),。這些光度噪聲很低的紫外可見分光光度計(jì), 在海洋生物學(xué)和生命科學(xué)的研究工作中, 或在分析小量樣品時(shí), 是非常有實(shí)用價(jià)值的,。目前國產(chǎn)的紫外可見分光光度計(jì), 光度噪聲都比較大。只有極少數(shù)儀器的光度噪聲很小, 如北京普析通用公司的TU-1901 , 其光度噪聲為±0. 0004Abs(峰-峰值) ,。 噪聲限制的測量下限為0. 04Abs 時(shí), 由噪聲引起的測量誤差還可達(dá)到1%,。所以, 我國的紫外可見分光光度計(jì)制造者們, 要下大工夫去努力降低儀器的光度噪聲。
目前, 國內(nèi)外的許多生產(chǎn)廠商, 不在樣本中給出儀器的光度噪聲, 這是不妥當(dāng)?shù)摹R驗(yàn)? 不給出儀器的光度噪聲, 使用者就無法判斷儀器在低濃度下是否適用, 其靈敏度,、準(zhǔn)確度是否能達(dá)到使用要求, 很難判斷儀器的適用性和可靠性, 將給使用者帶來很大的麻煩,。因此, 不管是低檔紫外可見分光光度計(jì),還是紫外可見分光光度計(jì), 都應(yīng)向使用者提供光度噪聲這個(gè)極其重要的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)。紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲與掃描速度是有很大的關(guān)系的,。一般來講, 掃描速度很快的紫外可見分光光度計(jì)的噪聲肯定是大的。反之, 如果一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)的噪聲很小, 那它的掃描速度是不會(huì)太快的,。所以, 目前上許多紫外可見分光光度計(jì)的制造商, 設(shè)計(jì)時(shí)都考慮到了掃描速度和光度噪聲之間的關(guān)系, 不會(huì)把掃描速度作得很快, 而把光度噪聲作得很大,。反之, 他們也不會(huì)把光度噪聲作得很小, 而把掃描速度作得很慢。但目前, 國外的確有些制造商把他們的紫外可見分光光度計(jì)的掃描速度作得很快, 而忽視光度噪聲, 這是不對(duì)的,。因?yàn)橐话銇碇v, 紫外可見分光光度計(jì)的掃描速度沒有光度噪聲重要,。起碼掃描速度對(duì)分析測試誤差沒有影響。而噪聲則是主要分析誤差的來源之一,。
二,、光度噪聲的表示方法
光度噪聲是儀器的一種隨時(shí)間而變化、但又是隨機(jī)的輸出信號(hào),。它是紫外可見分光光度計(jì)分析誤差的主要來源之一, 它直接影響儀器的信噪比和檢出限,。目前上對(duì)光度噪聲的表示方法有兩種: 一是用吸光度( Abs ) 表示;二是用透射比( %T ) 表示。日本和我國的紫外可見分光光度計(jì)生產(chǎn)廠商用透射比( %T ) 表示的較多, 歐美等國的紫外可見分光光度計(jì)生產(chǎn)廠商用吸光度( Abs) 表示的較多, 應(yīng)該說二者都可以,。但用吸光度( Abs ) 表示更好,。因?yàn)? 廣大使用者在使用紫外可見分光光度計(jì)的時(shí)候, 基本上都是用吸光度, 而不是用透射比。如果儀器的光度噪聲用透射比(% T ) 表示, 則在計(jì)算誤差時(shí), 還要把透射比換算成吸光度, 會(huì)給使用者帶來不必要的麻煩,。
三,、光度噪聲的測試方法
紫外可見分光光度計(jì)光度噪聲的測試, 目前接軌的測試方法是: 儀器冷態(tài)開機(jī), 預(yù)熱0. 5h 后, 試樣和參比比色皿均為空氣、設(shè)置吸光度為0Abs,、光譜帶寬為2nm,、波長為500nm。將儀器從長波到短波, 進(jìn)行時(shí)間掃描1h,。在1h 內(nèi), 任取10min 的測試數(shù)據(jù), 在多個(gè)10min 的測試數(shù)據(jù)中, 以那個(gè)10min 內(nèi)zui大的峰-峰值, 作為500nm 處的噪聲,。
關(guān)鍵詞:光度噪聲;紫外可見分光光度計(jì),;美析儀器,;UV-1800