細(xì)胞介紹

華雅干細(xì)胞提供的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是P1代的凍存細(xì)胞，或者P1\P2代復(fù)蘇細(xì)胞,，可為用戶量身定制,。該細(xì)胞取自滿月自然分娩的胎兒臍帶,，采用無血清人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基純化培養(yǎng)，凍存細(xì)胞每支含量為≥2.2×10⁶個(gè),，復(fù)蘇細(xì)胞每T-25含量≥1.5×10⁶,。該細(xì)胞無支原體、病毒,、細(xì)菌等外源性微生物污染,；內(nèi)毒素指標(biāo)符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)；具有良好的增殖和分化能力,，可以培養(yǎng)多代并維持未分化狀態(tài),；可附帶干細(xì)胞表面標(biāo)記物流式鑒定報(bào)告及相應(yīng)病原微生物檢測報(bào)告。

貨號

HUMSC-01,；HUMSC-02A/B,；HUMSC-03A/B

規(guī)格

按需定制

培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基或常規(guī)培養(yǎng)體系

運(yùn)輸

干冰/特制運(yùn)輸體系

細(xì)胞特征

細(xì)胞鏡下觀察：細(xì)胞貼壁, 長成梭形，有些細(xì)胞排列呈魚貫狀相連,，間有旋禍狀排列,。經(jīng)過測試具備間充質(zhì)干細(xì)胞的性能特征，具有良好的增殖和分化潛能,，可分化為成骨細(xì)胞,、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等,。

質(zhì)量控制

嚴(yán)格的細(xì)菌,、真菌、病毒（HIV,、HBV,、HCV）、支原體檢測,，可附第三方檢測報(bào)告,。

培養(yǎng)條件

37℃，5% CO₂,，PH值7.2~7.4,，無菌恒溫培養(yǎng)。

用途

本產(chǎn)品僅供科研,。

相關(guān)操作

細(xì)胞復(fù)蘇

1.把HUMSC培養(yǎng)基放入37℃水浴中預(yù)熱,；

2.從液氮中取出HUMSC迅速放入37℃水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)孵育細(xì)胞）；

3.在超凈臺中加入5ml的HUMSC培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，1000rpm離心5min,；

4.棄上清，加入5ml的HUMSC培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，轉(zhuǎn)移到T-25培養(yǎng)瓶,；

5.將培養(yǎng)瓶置于37℃,，5% CO₂的無菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

6.第二天,，用新鮮的HUMSC培養(yǎng)基給細(xì)胞換液,。

傳代培養(yǎng)

1.在顯微鏡下觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融合度至80%時(shí),，即可傳代,；

2.37℃水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.在超凈臺中,，棄掉T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,；

4.在顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓,，有細(xì)胞開始脫離瓶壁時(shí)，即可加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

5.用移液器輕輕吹打瓶壁上剩余的細(xì)胞,，并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞吹散；

6.將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,，1200rpm離心4min,；

7.棄上清，加入15-20ml的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T-75細(xì)胞培養(yǎng)瓶中或按適當(dāng)比例傳到 T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,。確保細(xì)胞貼壁后融合度在25-50%之間,，細(xì)胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25 瓶），混合細(xì)胞懸液,，確保細(xì)胞均勻分布,；

8.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶置于37℃，5% CO2的無菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

9.每兩天用新鮮、預(yù)熱的培養(yǎng)基進(jìn)行換液,。

細(xì)胞凍存

1.細(xì)胞消化和計(jì)數(shù),，用胰酶對待凍存的細(xì)胞進(jìn)行消化，并對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),。

2.1200rpm離心4分鐘,，去掉上清。

3.根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)的情況,，加入適量的凍存液,，使細(xì)胞密度在1×106/ml左右（或根據(jù)自己希望達(dá)到的細(xì)胞密度）。

4.輕輕地重懸細(xì)胞,，將重懸的細(xì)胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標(biāo)記或者貼上標(biāo)簽）中,，旋緊凍存管蓋,。

5.將凍存管放入程序降溫凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃,。

6.第二天將細(xì)胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中,。

提示：細(xì)胞培養(yǎng)方案及涉及到的所有試劑耗材，可統(tǒng)一匹配,，具體詳情,，可在線咨詢。

相關(guān)產(chǎn)品：

血清

血清替代品

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基

細(xì)胞因子

流式抗體

培養(yǎng)瓶

移液管

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