細(xì)胞
培養(yǎng)基
細(xì)胞培養(yǎng)基是鹽、碳水化合物,、維生素,、氨基酸、代謝前體,、生長(zhǎng)因子,、激素和微量元素的復(fù)雜混合物。不同的細(xì)胞系培養(yǎng)的成分要求不同,,從而產(chǎn)生了不同類型的培養(yǎng)基,。
經(jīng)典的商品化培養(yǎng)基有很多種,其中DMEM,、RPMI 1640,、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用廣泛的培養(yǎng)基,。其他如:M199 ,、IMDM 、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng),。
常用培養(yǎng)基
01
MEM培養(yǎng)基
是一種添加了營(yíng)養(yǎng)物的基礎(chǔ)必需培養(yǎng)基,,僅含有12種必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8種維生素,,含糖量為1g/L,。MEM是一種最基礎(chǔ)、最,、常用的細(xì)胞培養(yǎng)基,,主要應(yīng)用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),在添加血清后,可用于培養(yǎng)多種單層生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如成纖維細(xì)胞,。配方修改后的的a-MEM則能廣泛應(yīng)用于各種哺乳動(dòng)物懸浮和貼壁細(xì)胞培養(yǎng),。
02
DMEM培養(yǎng)基
氨基酸含量是MEM的兩倍,,維生素含量是MEM的4倍,以及硝酸鐵,、丙酮酸鈉和一些補(bǔ)充氨基酸,。此外,DMEM分為低糖型和高糖型,,葡萄糖含量分別為1g/L和4.5g/L,。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),特別適用于生長(zhǎng)速度快,、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng),;高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。
03
IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基
Guilber和Iscove將Dulbecco' Medium改良為Iscove's Medium,,用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體,。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素,、丙酮酸鈉和HEPES,。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B淋巴細(xì)胞,,LPS刺激的B細(xì)胞,,骨髓造血細(xì)胞,T細(xì)胞和淋巴瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),。IMDM為營(yíng)養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,,因此可以用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。
04
DMEM/F12培養(yǎng)基
DMEM和F12的1:1混合物,,能夠在低血清條件下支持多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),,在此培養(yǎng)基中成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括:MDCK、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,、成纖維細(xì)胞和人內(nèi)皮細(xì)胞等,。
05
L15 細(xì)胞培養(yǎng)基
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株,。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,,氨基酸組成進(jìn)一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖,。
06
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,,針對(duì)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì),含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。現(xiàn)也用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,如哺乳動(dòng)物,、特殊造血細(xì)胞、正?;驉盒栽錾陌准?xì)胞,,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),其它像K-562,、HL-60,、Jurkat、Daudi,、IM-9等成淋巴細(xì)胞,、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
07
McCoy’s 5A培養(yǎng)基
廣泛用于多種原代細(xì)胞及細(xì)胞系的培養(yǎng),,如來(lái)源于骨髓,、皮膚、脾臟,、腎臟和肺等組織的哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞,。
08
M199細(xì)胞培養(yǎng)基
1950年Morgan等設(shè)計(jì)的具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,即M-199,。除BSS外,,含有53種成分,為全面培養(yǎng)基,,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng),。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長(zhǎng)期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來(lái)源的細(xì)胞,,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞?,F(xiàn)廣泛用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn),。
09
Ham 's F-12K培養(yǎng)基
用于支持原代細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化,。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸,、生物素,、鈣、鎂,、腐胺和酚紅的含量,。
培養(yǎng)系統(tǒng)的主要成分
培養(yǎng)基含有維持可培養(yǎng)微生物所需的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),;除此之外,,培養(yǎng)基中還添加了許多不同的成分,,從而使培養(yǎng)基可以選擇培養(yǎng)或不培養(yǎng)某些微生物。培養(yǎng)基設(shè)計(jì)中的每種成分執(zhí)行特定的功能,,包括:
葡萄糖:用于細(xì)胞能量代謝,。
CO2:細(xì)胞需要少量的二氧化碳來(lái)維持生長(zhǎng)。
酚紅:用于監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基的pH值,。
非必需氨基酸NEAA
L-谷氨酰胺:幾乎是所有哺乳動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞所必需的氨基酸,,用于合成蛋白質(zhì),參與核酸代謝,。
丙酮酸鈉:丙酮酸是糖酵解過(guò)程中的中間有機(jī)酸代謝物,,可以輕易地進(jìn)出細(xì)胞,,可以為合成代謝過(guò)程提供能量來(lái)源和碳骨架,。
高品質(zhì)培養(yǎng)基推薦
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
1.呼吸道上皮細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)進(jìn)行了優(yōu)化,不含抗微生物劑,不含酚紅,。
2.細(xì)胞培養(yǎng)效果的一致性,、可重復(fù)性和高度可靠性
3.培養(yǎng)速度大于市售其他培養(yǎng)基
4.至少實(shí)現(xiàn)15次群體倍增生長(zhǎng)
5.細(xì)胞培養(yǎng)后保持優(yōu)異的細(xì)胞形態(tài)
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