RNA降解是一個常見的問題,，特別是在進行RNA提取和下游分析時,。以下是導(dǎo)致RNA降解的一些常見原因及其相應(yīng)的解決方案：
新鮮細胞: 裂解液不足會導(dǎo)致裂解不充分，從而使部分RNA未被釋放出來,。為了確保RNA釋放出來,，應(yīng)在裂解過程中加入足夠的裂解液。
新鮮組織: 若組織中含有內(nèi)源性核酸酶,，則很難避免RNA酶的降解,。建議采用的方法是在液氮條件下將組織研磨，并且,，在勻漿時采用更多的裂解液,。
冷凍樣品: 如果樣品未經(jīng)液氮速冷直接轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放，會使RNA緩慢降解,。為了避免這種情況,，應(yīng)在樣品取材后迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放,。
外源RNA酶的污染: 實驗試劑,、器械等實驗用品應(yīng)采用DEPC水滅菌處理，以消除外源RNA酶的污染,。
內(nèi)源RNA酶的污染: 抑制劑失效或者用量不夠,，以及實驗樣品過多或勻漿溫度過高都可能導(dǎo)致內(nèi)源RNA酶的污染。為了減少內(nèi)源RNA酶的影響,，可適當增加抑制劑的濃度,，確保樣品處理時處于適宜的溫度,。
長時間暴露于高溫或光照環(huán)境下: RNA容易受到紫外線和高溫的影響而發(fā)生降解，因此在實驗過程中應(yīng)避免樣品暴露于高溫或光照環(huán)境下,。
提取過程中的反復(fù)冷凍解凍: 這種情況會破壞RNA結(jié)構(gòu),，使其更容易受到酶的作用而降解。因此,，在RNA提取過程中應(yīng)盡量減少冷凍解凍次數(shù),，最好一次性完成整個提取過程。
產(chǎn)品名稱：PAXgene全血RNA管 樣本采集保存
產(chǎn)品貨號：762165
產(chǎn)品規(guī)格：2.5mL,，100支/盒
PAXgene血液RNA管旨在立即穩(wěn)定細胞內(nèi)RNA,，從而產(chǎn)生準確且可重復(fù)的基因表達數(shù)據(jù)。PAXgene血液RNA管含有一種專有試劑,，可在采集后立即穩(wěn)定細胞內(nèi)RNA,。細胞內(nèi)RNA在室溫下穩(wěn)定長達三天或在2-8°C下穩(wěn)定長達五天。PAXgene試管可以在-20°C至-70°C的溫度下冷凍,，以便長期儲存,。
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