轉(zhuǎn)染試劑是一種獨特的陽離子脂質(zhì)配方,,適用細胞系種類多,轉(zhuǎn)染效率高,,而且具有很高的蛋白質(zhì)表達水平或基因沉默或活性 (RNAi),。該產(chǎn)品是出色的轉(zhuǎn)染試劑,可簡單,、高效,、優(yōu)質(zhì)地將核酸轉(zhuǎn)入多種真核細胞內(nèi),而且適用于高通量操作,。
轉(zhuǎn)染試劑由納米高分子聚合物組成,,分子內(nèi)含有許多氨基,在生理PH下會發(fā)生質(zhì)子化,,這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負電荷,,使DNA分子由伸展結(jié)構(gòu)壓縮為體積相對較小的DNA粒子,并包裹在其中,,使DNA免受核酸酶的降解,。轉(zhuǎn)染復(fù)合物主要是通過細胞內(nèi)吞作用將DNA轉(zhuǎn)移進入細胞,,形成內(nèi)含體,DNA從內(nèi)含體釋放,,進入細胞質(zhì)中,,再進一步進入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達,。通過納米技術(shù)生產(chǎn)出的轉(zhuǎn)染試劑在納米尺度表現(xiàn)出結(jié)合保護DNA能力強,、毒性低的性能。
轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用:
將DNA導(dǎo)入哺乳動物細胞和昆蟲細胞,。
同病毒協(xié)同轉(zhuǎn)染難轉(zhuǎn)哺乳動物細胞,,可顯著增強病毒的轉(zhuǎn)染效率。
轉(zhuǎn)染試劑的使用及效果:
將2μg無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA和4μL本產(chǎn)品分別稀釋到50μL溶液A中,,將上述兩溶液混勻,,加入到在1mL培養(yǎng)基中生長了18-24小時、覆蓋率達到50-80%的培養(yǎng)細胞中,,輕搖以混勻,,然后在37℃/5%CO2孵箱中培養(yǎng),24-72小時后根據(jù)實驗需要進行瞬時表達分析或穩(wěn)定細胞系加壓篩選,。
轉(zhuǎn)染試劑主要用于哺乳動物細胞和昆蟲細胞的瞬時轉(zhuǎn)染以及穩(wěn)定細胞系構(gòu)建,,可以將轉(zhuǎn)染實驗操作縮短到一分鐘即可完成。本產(chǎn)品具有下列特點:
1,、本產(chǎn)品和質(zhì)?;旌虾鬅o需室溫靜置孵育,直接轉(zhuǎn)染,。
2,、毒性低,轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,。
3,、適合于多種常用的細胞系。
4,、可直接加入含血清的細胞培養(yǎng)基中進行轉(zhuǎn)染,,而且無需在轉(zhuǎn)染后補加血清和更換超快轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基。
5,、如果實驗?zāi)康脑谟诤Y選抗藥性穩(wěn)定細胞系,,可以在細胞傳代后可直接進行轉(zhuǎn)染實驗,不需轉(zhuǎn)染前細胞培養(yǎng)時間,。
6,、無需在轉(zhuǎn)然后4-6小時補加血清或更換培養(yǎng)基。
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