ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒,、ELISA Kit,、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,、酶聯(lián)免疫分析試劑盒,、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等,。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到科研工作者的認可及推崇,，在歐美及中國獲得很大的推廣,，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。
在ELISA試劑盒實驗中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的,，其中包括:
1、固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體,，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被,，在同一實驗條件下進行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
2,、包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度,，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進行包被后,，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml,。
3、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
4,、酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),，而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入,。
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